凝胶成像系统SDS_PAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白.pdf

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1、.第24年卷增刊2农业工程学报Vol.24SuPP2saetonsoe.20089月TranifthCSAESeP2008283一凝胶成像系统SDSPAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白,‘,米,,,,,’2’2’’李珊珊王加启魏宏阳张春刚刘光磊,,’,3’’赵圣国卜登攀周凌云(1.,北京;2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室100193农业部奶及奶制品(北京),北京1001:3.,兰州质量监督检验测试中心93甘肃农业大学动物科学学院730070):一,、4摘要为了建立一种检测市场上乳及乳制品中的

2、乳铁蛋白含量的简便方法sDs队GE法采集了10种液态奶、、,一—,、、种奶酪3种乳清蛋白粉4种酸奶和4种奶粉利用SDS队GE法分离乳铁蛋白并优化了分离胶的浓度电压上。一,,,:样量和染色方法经优化的SDS队GE法的操作条件为分离胶浓度为12%浓缩胶电压为120V分离胶电压为ZoV改良的考马斯亮蓝染色,乳铁蛋白标准品的点样浓度为o.lln川g/L,点样量为12林L。m采用此电泳条件分离不同乳及乳制品中的乳铁蛋白,运用凝胶成像系统测得乳铁蛋白含量的相对标准偏差小于10,%且测得的含量均高于其检出限和。同一样品同一块胶,同

3、一样品不同凝胶乳铁蛋白的含量相对标准偏差小于,定量限10%说明利用本方法得到的实验结果准确度高,重复性好。:;SDS一PAG;关键词乳制品E;乳铁蛋白定量测定.+.:TS252;TP2745:A:1002一6819(2008)一(upp2)一0283一06中图分类号文献标识码文章编号S李珊珊,王加启,魏宏阳,等.凝胶成像系统SDs一PAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白【J〕.农业工程学报,2008,.:一.24(Supp2)283288LiShsh,gJiaqi,eiHonang,etal.utiivedetenati

4、onoflaconnauetsananWanWgyQantarmitferii而Ikandd妙Prodby.,..Seeetossaseongensysteransaetonsoe,upp:nDS一AGElhreibdlim吧gm汇刀TifthCS200824(S2)283一288(ironAEehinesewithEnglishabstraet)析法、反向液相色谱法、ELIsA[川、低能量超声检测技0引言,术[12]等几种方法其中紫外分光光度法和双缩脉法测量,,,乳铁蛋白(LactoferinLf)是铁结合性糖蛋白

5、由乳清蛋白无法定性蛋白质中的呈色物质且只能测定总。转铁蛋白演变而来[’]乳铁蛋白在牛奶中的平均浓度为,,蛋白质不能测定乳清蛋白单一成分离子交换层析法,,,10m留mL在乳清蛋白产品中其浓度可高达30一和体积排阻色谱法更适合于IgG和其他蛋白的纯化而。,。10mg几[2]乳铁蛋白可以有效地抗菌抗病毒并能抑制不是作为一个量化技术[l3]超声检测技术在食品生产在游离基形成,调节人体铁质转移,促进细胞生长,提高线控制和品质检测上的应用主要受到检测精度和稳定性,,。]。免疫能力促进双歧杆菌增殖并可作为抗氧化剂[3,4的限制I’

6、2]其他的几种测量方法需要有专门的仪器或特鉴于乳铁蛋白高营养价值的特点,生鲜牛乳中的乳铁蛋定的试剂,不适于生产实践[7j。国标方法(GB/T5413.2-,。,白经过加热会遭到破坏营养价值也相应降低%℃1997)只适用于婴幼儿配方食品和乳粉中酪蛋白与乳清蛋,。3而n时乳铁蛋白被10%降解[5]为检测乳与乳制品中,,白含量比率的测定也不能测定乳清蛋白的单一成分乳铁蛋白的含量,,,。分析乳铁蛋白经加热后损失程度需且需使用光度扫描法所用仪器光密度计价格昂贵、一,要建立一种快速准确的方法测定乳及乳制品中乳铁蛋SDSPAGE电

7、泳是蛋白质分析中最常用的方法也是白含量。并且此方法为有关部门建立相关测定标准提供乳铁蛋白研究中应用最广泛的方法。该方法虽然不能有。,参考效分离乳清蛋白中的免疫球蛋白[l4]但是乳铁蛋白能很,一目前国内外所采用的检测牛乳中活性蛋白的方法主好的分离开Benet等【’5]运用sDsGE法定性定量分队:、、、要有紫外分光光度法[6l双缩脉法[7]浊度法[8]毛细析G。SDS一GE了牛初乳中的Ig队的定量研究中多采用、[l0]、、管电泳法l0]lowry法体积排阻色谱法离子交换层光度扫描进行。本试验,通过筛选电泳条件运用凝胶成

8、像系统结合电泳图谱得出乳及乳制品中乳铁蛋白含量。:一一:一一收稿日期200806巧修订日期2080925希望能为检测乳及乳制品中乳铁蛋白含量提供更为简:;DFB32160)基金项目科技支撑计划(2006BAD04A03)国际合作项目(2006、。易可操作性强的分析方法一一。和农业结构调整(0606olA)作者简介:李珊珊,,,(1985一)女黑

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