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时间:2020-03-12
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1、药物对离体豚鼠回肠的作用实验原理(Principle)ACh回肠M受体平滑肌收缩↑胞浆Ca2+↑Ca2+内流↑平滑肌Ca2+通道开放阿托品回肠M受体H1受体组胺扑尔敏H1受体G蛋白平滑肌收缩肌浆网释放Ca2+Ca2+通道外Ca2+内流氯化钡平滑肌收缩↑肌浆[Ca2+]↑触发肌浆网释放Ca2+Ba2+经钙通道进入胞浆胆碱能神经释放ACh实验目的(Objectives):1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻断作用。1.材料与方
2、法(materialsandmethods):1.1实验动物豚鼠1.2药品与试剂10-2g/Lacetylcholinechloride溶液,1g/Latropinesulfate溶液,10-2g/Lhistaminephosphate溶液、10-3g/Lchlorpheniramine溶液、10g/LBaCl2溶液、台氏液。1.3仪器和装置1.3.1麦氏浴槽出水口进水口固定钩麦氏浴槽1.3仪器和装置1.3.2记录仪器RM6240C微机生物信号处理系统1.4.1用木槌击豚鼠头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后在
3、离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约1~1.5cm),用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。1.4离体肠肌制备1.4.2取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。1.4.3肠管固定:取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在
4、张力换能器的悬臂梁上。1.4.4肠肌稳定:调节张力至1g,稳定10~30分钟。2.1ACh→洗脱2.2ACh→atropine→洗脱2.3histamine→洗脱2.4chlorpheniramine→histamine→洗脱2.5BaCl2→atropine2.观察项目3.结果表1药物对离体豚鼠回肠张力的影响(g)项目处理前处理后acetylcholineacetylcholine+atropinehistaminechlorpheniramine+histamineBaCl2BaCl2+atropine3.1Ac
5、etylcholine作用于离体豚鼠回肠,其张力由1.1g增至3.5g,在acetylcholine作用基础上向灌流夜中加入atropine,回肠张力由3.5g降低至1.1g。见表1和图1。Ach:acetylcholine,乙酰胆碱Atr:atropine阿托品His:histamine组胺Chl:chlorpheniramine氯苯那敏图1药物对离体豚鼠回肠作用Ach换液AchAtrAch换液His换液ChlHisBacl2Atr稳定20min(每次换液后稳定10min)4.讨论4.1Acetylcholine作
6、用于离体豚鼠回肠使其张力升高,用atropine后,回肠张力降低,atropine为肠平滑肌细胞膜上M受体的阻断剂,由此可见,Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠平滑肌细胞膜上的M受体使平滑肌收缩。4.2…
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