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时间:2020-03-14
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1、溶菌酶作用机理1.溶菌酶:是催化某些细菌细胞壁水解、从而溶解其细胞壁的酶,主要存在于鸡蛋清及动物的眼泪中。2.细胞壁多糖:是N-乙酰氨基葡萄糖(NGA)-N-乙酰氨基葡萄糖乳酸(NAM)的共聚物,其中的NGA及NAM通过b-1,4糖苷键而交替排列:3.溶菌酶的结构:由129个氨基酸组成的单肽链蛋白质,含有四对二硫键,一级结构如图所示4.溶菌酶的催化作用:为葡糖苷酶,能水解NAM的C1与NAG的C4之间的糖苷键,但不能水解NAG的C1与NAM的C4之间的糖苷键,水解作用如下:5.溶菌酶的三维结构:溶菌酶分子内部几乎是非极性的,在分子的表面有一个较深的裂
2、缝,恰好能容纳多糖底物的六个单糖(ABCDEF环),是溶菌酶的活性部位,其中白色所示的是活性部位的Glu35和Asp52。6.溶菌酶与底物的复合物的三维结构:7.溶菌酶-底物结合部位示意图:NAG多聚体水解速率表明从5到6聚体增加到最大,活性部位的裂缝正好被六个糖残基所装满,水解部位是D和E之间的糖苷键8.溶菌酶与底物的复合物的三维结构示意图:第四个糖残基D环由于空间的原因必须由正常的椅式变形为能量较高的半椅式,因此降低了糖苷键的稳定性容易断裂。9.溶菌酶催化作用机制要点总结:(1)Glu35的-COOH提供一个H+到D环与E环间的糖苷键O原子上。H
3、+的转移使D环的C1键与糖苷键O原子间的键断开,并形成正碳离子过渡中间产物。(2)含有E及F残基的NAG二聚体离开酶分子。(3)正碳离子中间产物进一步与来自溶剂的OH-发生反应,Glu35质子化,酶游离出来。
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