不同培养体系对白木香成熟胚丛芽诱导的影响研究.doc

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时间:2020-03-29

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1、不同培养体系对白木香成熟胚丛芽诱导的影响研究【摘要】目的初步筛选出最适合口木香胚愈伤组织诱导的培养基,为白木香胚的继代培养和植物再生研究打下基础,为展开白木香的种质保存和继代培养的研究捉供参考依据。方法通过各种激素成分的正交实验设计,以白木香成熟胚为材料,诱导愈伤组织和丛芽。结果发现以1/2MS0:1/2MS培养基的诱导率最高,为100%;而诱导效果则以MIZ:MS+IAAO.lmg/L+ZTO.5mg/L培养基为最佳。结论综合考虑各种因素,以MTZ培养基为最适合诱导白木香胚愈伤组织的培养基。【关键词】白木香;成熟胚;丛芽Abstract:Object!veToselectthef

2、ittestculturemediumsforinducingcallusesfromembryoofAquilariasinensis(Lour・)Gilg・MethodsThroughorthogonaldesignforthecomponentofseveralkindsofhormone,theembryowasculturedtoinducedcallusesinelevenculturemediums・ResultsTnductionrateonl/2MS0culturemediumwasthehighest,cominguptolOO%,whi1ethebesteff

3、ectwasonMTZculturemedium.ConclusionMTZculturemediumwasmostsuitahleforindueingcallusesfromembryoofAquilariasinensis(Lour・)Gilg・KeywordsAqui1ariasenensis(Lour・)Gi1g;Culturemediums;Cal1uses白木香[1]Aquilariasinensis(Lour.)Gilg又名土沉香,来源于瑞香科沉香属植物。白木香是我国特有的药用植物,也是我国生产中药沉香的唯一植物资源[1]。白木香以含有带棕黑色树脂的干燥心材入药,具

4、行气止痛、温中止呕、纳气平喘功效,用丁治疗胸腹胀痛、胃寒呕吐、心腹疼痛、禁口毒痢、大肠虚闭、气逆、喘息等症。沉香是屮国、日本、印度及其它东南亚国家的传统名贵药材和名贵天然香料,也是广东道地药材,十大广药之一[1]。近年来,由于人们对沉香的大量釆挖,白木香原始林遭到严重破坏,白木香野生资源量不断减少,被列为国家二级保护野生植物,己载入《屮国植物红皮书》和《广东省珍稀濒危植物图谱》。白木香种子为顽拗型,含油率高,极易变质及丧失萌发力,天然更新能力弱。白木香的繁殖方式主要为种子繁殖。随采随播的发芽率可高达80%以上;贮存15d后,发芽率降至50%以下;贮存3个月的种子完全丧失发芽率[2]

5、。本研究通过组织培养技术,探讨白木香离体再生的不同培养条件,以期为白木香种质资源的保存和优质种苗的离体快繁生产及选育奠定基础。1材料与仪器1.1材料为采自电白县白木香种植基地新鲜的成熟种子。1.2培养基以MS或1/2MS为基本培养基,并在其基础上添加不同种类、不同剂量的生长激素、无机盐等。表1不同培养基配方(略)所有培养基均加入3%的蔗糖和0.75%的琼脂条固化,pH值为5.8±0.1o而后将配制好的培养基分装丁玻璃瓶中,每瓶约10ml,进行高压灭菌。1.3接种方法将种子用洗洁精轻轻荡洗一遍后,在自来水下流动冲洗20〜30min,材料经上述处理后,在无菌条件下,用75%的酒精浸泡消

6、毒8〜10s,然后置于0.1%的升汞溶液屮灭菌消毒5~8min,再用无菌水洗涤7〜10次。在接种时,将白木香种子的种売及附属物剖去,取出胚,接种到培养基中,每瓶培养基接种3〜4个胚。1・4培养条件置于培养室中进行培养,光照强度2500LX,每日光照8〜10h,培养温度(26±0.2)°C。2结果实验操作如上所述,60d后结果记录见表2O表2不同培养基对白木香胚愈伤组织诱导率的影响(略)由表2可以看出,1/2MS0培养基的愈伤组织诱导率最高(100%),其次为1/2MB0.2和MIZ培养基("90%);1/2MB0.5、MBO.5及MB0.05等培养基的诱导率一般(60%〜75%);

7、而MBD、1/2MBN、MBN、IB1和1/2MKI等培养基的诱导率极低(约为0),不适于白木香胚愈伤组织的诱导。生长在1/2MS0±胚的愈伤组织颜色浅绿,质地较为致密,出愈率高(100%),但是生长速度慢,而且愈伤组织在生长的过程中容易发生褐化的现象,导致愈伤组织的出苗率不高(54%)。1/2MB0.2培养基上的愈伤组织颜色较绿,质地酥脆,玻璃化现象比较严重,因此,愈伤组织的出苗率也不高(43.48%)o而生长在MIZ培养基上的愈伤组织颜色深绿,质地致密,不容易褐化

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