自身抗体检测及应用-华西医院.ppt

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1、自身抗体检测及应用彭晓东自身免疫(autoimmunity)机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。自身抗体(autoantibody)针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体。概念自身免疫性疾病(autoimmunedisease，AID)因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。自身抗体的特性自身免疫性疾病的重要标志高滴度存在于自身免疫性疾病患者与疾病的活动性相关参与免疫病理性损伤检测自身抗体常用的方法间接免疫荧光法（IIF）ELISA免疫印迹法（Western-blot）酶免疫斑点法常检测的自身抗体

2、类风湿因子（RF）抗核抗体（ANA）抗可提取性核抗原抗体（ENA）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗角蛋白抗体（AKA）抗心磷脂抗体（ACA）类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）抗变性IgGFc的自身抗体，主要类型是IgM型致病机理：RF与体内变性IgG结合形成免疫复合物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质导致组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎。检测方法：1.胶乳颗粒凝集实验定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF2.速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE）定量、准确、快速，测定IgM-RF3.ELISA定量、准

3、确，可测定不同类型的RF临床应用：（1）RF在RA、SLE、PSS等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。疾病阳性率%RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25（2）RF滴度与RA患者临床表现呈正相关，IgM-RF效价>80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。（3）IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关，常伴随IgM-RF同时出现，在正常人及非RA患者中很难检出。（4）IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。临床应用：抗核抗体（antinuclear

4、antibody，ANA）以真核细胞（如HEp-2细胞、肝细胞）的各种细胞核成分为靶抗原所检测的自身抗体的总称。分类和命名以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗体等；以相关疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗体等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；以抗原的化学性质进行分类命名，如抗DNA、抗RNP、抗组蛋白抗体等。抗核抗体检测方法间接免疫荧光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑点法ELISA免疫印迹法（Western-blot）间接免疫荧光法H

5、Ep-2细胞肝组织切片荧光标记抗体病人血清（待检抗体）细胞核细胞浆细胞骨架细胞周期均质型核糖体型肌蛋白型中心体型斑点型线粒体型波形纤维蛋白型纺缍体型核仁型高尔基体型细胞角蛋白型纺缍丝型着丝点型溶酶体型原肌球蛋白型中间体型周边型颗粒型纽带蛋白型PCNA型核点型(dots)结蛋白(桥粒)型IIF检测ANA荧光染色模型斑点型（nRNP/Sm）高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性。斑点型（SSA/SSB）抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼疮（100%）。抗SSB抗体几乎仅见于女性，可出现于SS和SLE。均质型抗dsD

6、NA抗体抗组蛋白抗体(histone)抗ssDNA抗体抗核小体抗体(nucleosome)抗dsDNA抗体SLE特异性抗体，与病情活动度相关。周边型可见于胶原病、PBC、CAH等患者核点型（DOTS）见于SLE、SS、PBC、风湿病。抗着丝点型PSS局限型标志抗体。抗原纤维蛋白型仅见于5%-10%的PSS，男性高于女性。抗RNA多聚酶Ⅰ型抗体仅见于硬皮病患者，阳性率为4%。抗PM-Scl（PM-1）抗体见于重叠综合征（多发性肌炎PM/皮肌炎DM/弥漫性PSS）抗Scl-70型PSS弥漫型的标志抗体。增殖细胞核抗原Ⅰ型（PCNA）SLE特异性抗体，与

7、发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关。抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体抗线粒体抗体（AMA）SLE标志抗体原发性胆汁性肝硬化标志抗体抗Jo-1抗体抗高尔基体抗体多发性肌炎（PM）标志抗体偶见于SLE和SS抗肌动蛋白抗体见于自身免疫性慢性活动型肝炎抗ENA抗体谱ENA(extractablenuclearantigen)：可提取核抗原的总称临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括：抗Sm抗U1-RNP抗SSA抗SSB抗Jo-1抗Scl-70抗rib-P蛋白检测方法双向免疫扩散（ID）对流免疫电泳（CIE）免疫印迹法（Western-blot）ELISA酶免疫斑点

8、法免疫印迹法SDS-PAGE电泳转移电泳酶免疫检测是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的