菌种管理规程.doc

《菌种管理规程.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、文件名称菌种经管规程文件编号QB-WI/10-004-00版本号00页码制定人制定日期审核人审核日期批准人批准日期生效日期经管部门质量部分发部门总经理□技术部□质量部□生产部□经管者代表□商务部□销售部□行政部□仓库□序号修订原因及目的修订内容01文件新建/2/13文件名称菌种经管规程文件编号QB-WI/10-004-00版本号00页码1.目的规范微生物学检定用菌种的经管，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。2.适用范围适用于微生物实验用菌种经管，包括菌种的申购、传代

2、、使用及销毁等。3.引用/参考文件ChP2015实用药品微生物检验检测技术指南4.职责质量控制实验室负责菌种的申购、传代、使用、销毁等工作，QA负责监控和参与OOS调查。5.程序5.1术语和定义5.1.1规范菌株由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏经管中心或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌。5.1.2传代菌株用规范菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种，3代后的传代菌株在需要时可以作为工作菌株使用。5.1.3工作菌株用规范菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工

3、作使用的菌种。5.1.4菌种的代将菌种接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。5.2菌种来源5.2.1规范菌株由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心（CMCC）或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌种。5.2.2质量控制实验室涉及到的菌种种类、代码、保存方法及保存条件如下。2/13菌种名称菌种代码保存方法保存温度保存期限金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003TSA斜面2～8℃1个月冷冻干燥管-20℃1年铜绿假单胞菌CMCC(B)10104TSA斜面2～8℃1

4、个月冷冻干燥管-20℃1年枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501TSA斜面2～8℃1个月冷冻干燥管-20℃1年白色念珠菌CMCC(F)98001SDA斜面2～8℃3个月冷冻干燥管-20℃1年黑曲霉菌CMCC(F)98003SDA斜面2～8℃3个月冷冻干燥管-20℃1年生孢梭菌CMCC(B)64941TSA斜面2～8℃1个月冷冻干燥管-20℃1年5.3菌种的申购、验收、保存5.3.1菌种的申购5.3.1.1微生物室QC依据菌种的库存及菌种的使用情况，提出采购申请，申请需明确菌种的名称，规范编号以及申购数量等信息。5.

5、3.1.2质量部经理对申购计划进行审批，审批后由公司的商务部按要求进行采购，采购过程执行《采购控制程序》。5.3.1.3菌种的采购需向法定的业务部门或者认可的机构采购。5.3.1.4购买菌种的同时应保留相关证明资料，说明菌种的名称、代数、数量等。5.3.2菌种的验收5.3.2.1微生物室QC负责对采购回的菌种以及相关的证明资料进行验收；5.3.2.2验收应包括菌种外包装的完好性、具体验收的依据为批准后的申购计划。5.3.2.3验收符合后签字确认并领回菌种，及时填写《菌种验收、入库记录》，并将菌种的相关证明资料贴在

6、菌种接收登记表当页背面留存。如验收不符合则拒绝签字领用，商务部负责退货处理。5.3.3菌种的保存5.3.3.1验收合格的冷冻干燥菌种，应保存在温度设定为-20℃冰箱中保存，有效期可至1年。5.3.3.2验收后的菌种需在验收合格接收后14天内完成转种。5.4菌种的传代2/135.4.1菌种的传代次数不得超过5代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代（G0），冷冻干燥的原始菌种开启后转种，为第1代（G1）；5.4.2规范菌种的复苏、确认及传代5.4.2.1规范菌种的复苏5.4.2.1.1将一次性吸管数支、培养皿

7、、镊子、冻干菌种管、装有TSB试管或SDB试管等移入生物安全柜中，开启生物安全柜的紫外灯灭菌30min后关闭紫外灯，备用。5.4.2.1.2将冻干菌种管外壁用75%的乙醇棉球擦拭一遍，放入培养皿中，待干。点燃酒精灯，将规范菌种管封口的一端过火后开启，用一次性吸管吸取少量相应液体培养基或者稀释液，加入冻干管内将菌种溶解。黑曲霉的菌种因为是孢子悬液管不需要加入液体培养基，直接拧开即可。5.4.2.1.3将菌种加入到相应的液体培养基中，根据菌种类型的不同将其置于不同温度下培养不同时间。原冻干菌种管、使用过的一次性吸管待

8、121℃，30min高温湿热灭活后处理。不同菌种稀释液与培养条件见下表。菌种名称菌种代码稀释液培养温度培养时间金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003TSB30-35℃72h铜绿假单胞菌CMCC(B)10104TSB30-35℃72h枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501TSB30-35℃72h生孢梭菌CMCC(B)64941硫乙醇酸盐流体培养基30-35℃18-24h白色念