木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的条件优化-论文.pdf

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1、1482012，Vo1．33,No．07食品科学※生物工程木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的条件优化吴非，于胜男，葛锡娟，刘畅，李响(东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨150030)摘要：用木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶解，制备大豆抗癌活性肽，并对其细胞生长抑制率、水解度和木瓜蛋白酶的最优作用条件进行研究。结果表明：在整个酶解过程中，大豆抗癌活性肽都具有明显的抗癌作用，但水解度与大豆抗癌活性肽的细胞生长抑制率之间不呈线性关系。底物质量浓度、酶用量、酶解温度、酶解时间和反应pH值都影响大豆抗癌活性肽的细胞生长抑制率。木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的最优酶解条件为：底物大豆抗癌活性肽的浓度6g／100

2、mL、酶用量7000U／g、酶解温度55℃、酶解时间4h、反应pH7．5，在此条件下得大豆抗癌活性肽细胞生长抑制率为28．13％。关键词：木瓜蛋白酶；大豆抗癌活性肽；最优条件OptimizationofPreparationConditionsforSoybeanAnticancerPeptidesbyPapainHydrolysiswUFei，YUSheng—nan，GEXi-juan，LIUChang，LIXiang(CollegeofFoodScience，NortheastAgriculturalUmve~ity，Harbin150030，China)Abstract：Inthiss

3、tudy，operatingconditionsfortheenzymaticpreparationofanticancerpeptidesfromsoybeanproteinisolatewimpapainwereoptimizedformaximuminh~imryrateagainstthegrowthofhumangastriccancerSGC一7901cells．Peptideswiththehighestanticanceractivitywereobtainedafter4hofhydro~satpH7．5and55℃withpapainatadoseof7000U／gand

4、asubstrateconcentrationof6g／100mL．Allhydrolysatescollectedatselectedtimepointsduringthehydrolysisprocesshadobviousanficanceractivity，whilenolinearrelationshipbetweendegreeofhydrolysisandcellgrowthinhibitoryrateWasfound．Allsubstrateconcentration，enzymedose，hydrolysistemperature，hydrolysistimeandpHco

5、uldaffectcellgrowthinh~itionrateofhydrolysates．Keywords：papain；soybeananti—cancerpeptides；optimalconditions中图分类号：Q814．9文献标识码：A文章编号：1002—6630(2012)07．0148．05大豆是中国古老的作物之一，含有35％~40％的蛋肽具有十分重要的意义。大豆抗癌活性肽安全性高、毒白质，是食物蛋白的一种重要来源。大豆肽是指大豆蛋副作用小、容易吸收、易于制备【-s】。本实验对生产大白经蛋白酶作用后，再经过特殊处理所得到的蛋白质的豆抗癌活性肽的酶解条件和水解度与抗癌活性之

6、间的关分解产物[1．。大豆肽具有较高的营养价值，同时也具有系进行研究，以为开发大豆抗癌活性肽产品、预防和较高的功能活性如抗氧化、抗疲劳和抗高血压等[3-4】。前辅助治疗疾病、促进大豆精深加工提供参考。期实验研究结果表明，用蛋白酶作用于大豆分离蛋白，l材料与方法可以制备大豆抗癌活性肽；在众多的蛋白酶中，木瓜蛋白酶的作用效果最明显。目前国内外对制备大豆抗癌活1．1材料、试剂与仪器性肽酶解条件的研究较少。大豆分离蛋白由国家大豆工程技术研究中心提供。癌症是当今发病率最高的疾病，我国每年约有130胃癌细胞SGC．7901由教育部国家乳品科学重点实验多万人死于癌症，而且其发病率和死亡率还在逐年递室提供；

7、木瓜蛋白酶无锡杰能科生物有限公司；其增。合成的抗癌药物虽能有效地控制疾病，但同时它他试剂均为分析纯。也能造成免疫系统损伤、骨髓受抑制等副作用【。我国快速离心机北京医用离心机厂；凯氏定氮仪上是大豆的主产国，大豆资源丰富，研究大豆抗癌活性海新嘉电子有限公司；冷冻干燥机上海医用离心机收稿日期：201I-04．19基金项目：黑龙江省科技攻关计划项目(GA09B401．2)作者简介：吴非(1968一)，女，教授，博士，