红细胞电泳检测方法在老年期痴呆诊断中的临床意义.doc

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1、红细胞电泳检测方法在老年期痴呆诊断中的临床意义中华神经科杂志1999年第4期第32卷论著摘要作者：张京立陶国枢吴青刘晓玲单位:100853北京，解放军总医院老年医学研究所扁平苔辭发病机理不淸，近來有人报道扁平苔薛中的细胞凋亡较明确、典型。过去在扁平苔薛中发现的胶样小体经研究证实为凋亡小体［1］。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在扁平苔薛发病屮的意义，我们采用免疫组化方法检测了扁平苔薛屮细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas及bax。一、材料和方法1.标本来源

2、：采用1994〜1997年我院保存的石蜡包埋纽织块。扁平苔稣12例（其中2例为色素性扁平苔鉢），其中男6例，女6例；年龄15〜63岁，平均年龄31.25岁。6例止常人皮狀纽织，皆取自皮脐外科行重睑术、面部美容切除术者的皮狀，石蜡包埋作为対照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规纽织切片及HE染色，在光镜下核対诊断，证实;It病理诊断无误方采用。2.试剂：鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自Dnko公司，生物索化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bnx多抗及链毒亲和索一生物索一过氧化酶复合物免疫纟I［化试剂盒（简

3、称SABC试剂盒）均购自武汉博士徳生物工程公司=3.方法：载玻片用APES处理后干燥备用，切収4〜5卩m厚的石蜡切片，常规脱蜡水化。bcl・2基因的检测参照ABC法稍加改进，阳性对照为止帘淋巴结，阴性对照不加一抗。Fas、bax基因的检测采用SABC法，阳性对照分别为武汉博士徳生物工程公司提供的Fas、bax阳性对照片，阴性对照为不加一•抗。4.结果判断：显微镜下观察，棕黄色为阳性结果。阳性强度判断标准如下：强阳性（+++）为50%以上细胞阳性染色；中等强度阳性（卄）为25%〜50%细胞阳性染色；弱阳性（+）为25%以下细胞阳性染

4、色；阴性（一）为细胞均无任何阳性染色。二、结果6例止帘人皮肤纽织bcl・2基因除基底细胞部分呈阳性反应外，余均阴性。Fas和bax基因6例均为阴性表达。12例扁平苔御组织bcl・2基因表皮均为阳性衣达，英中5例为弱阳性，7例为中等强度阳性，阳性染色主要位于棘层、颗粒层和汗腺周围，同时真皮浅层淋巴细胞亦见弥漫阳性表达。Fas和bax基因在12例组织真表皮中均呈广泛阳性表达，英中3例Fas为中等强度阳性，9例为强阳性。5例bnx为中等强度阳性，7例为强阳性。在缺少一•抗的对照反应中结果均为阴性，血作为阳性对照的正常淋巴结及Fas、ba

5、x阳性对照片则呈广泛强阳性染色。三、讨论1988年Vaux等首次证实bcl-2高表达可以引发肿瘤，并且发现它可以明显延长细胞的生长期，而対细胞的增殖率没有明显的影响。后来人们发现它不影响细胞的增殖率，而是作为细胞凋亡的一个潜在抑制因子调节细胞死仁我们的实验中正常人的皮肤组织部分基底细胞bcl-2基因呈阳性反应，这与国外学者的报道相符合［2］。扁平苔解组织病理显示在真皮浅层有淋巴细胞浸润带。扁平苔薛中bcl-2基因阳性主要位于棘层、颗粒层和汗腺周围，同时真皮浅层淋巴细胞亦见广泛强阳性衣达。bax屈于bcl・2基因家族成员，其功能与b

6、cl-2相反，为促凋亡基因，bax蛋白可与bcl-2蛋白形成异源二聚体，从『U抑制bcl?2的抑凋亡作用。实验中扁平苔鉢纽织中促凋亡基因Fas、bax均为阳性表达，这与国外学者的结论一致［3］。目前认为bcl-2基因与bax基因表达产物的比例决定着细胞是否接受死亡指令，当bcl-2蛋白占优势时，所有的bax被结合而剩余的bcl-2起到抑制细胞凋亡的作用，细胞存活；相反，当bax多于bcl-2时，bax蛋白介导细胞死亡［4］。我们认为扁平苔鉢中抑凋亡基因bcl-2与促凋亡基因Fas、bax均具有重要意义，只是促凋亡作用可能更占优势。

7、参考文献1WeedonD.Civattebodiesandapoptosis.BrJDermatol,1974,91:357.2vandenOordJJ、VandeghinsteN,DeLeyM,etal.Bcl-2expressioninhumanmelanocytesandmelanocytictumors.AmJPathol,1994,145:294—300.3OishiM,MaedaK,SugiyamaS.Distributionofapoptosis-mediatingFasantigeninhumanskinandef

8、fectsofanti-Fasmonoclonalantibodyonhumanepidermalkeratinocyteandsquamouscellcarcinomacelllines.ArchDermatolResJ994,286:396—4