HPLC法测定硫酸氨基葡萄糖相关物质N-乙酰氨基葡萄糖-论文.pdf

《HPLC法测定硫酸氨基葡萄糖相关物质N-乙酰氨基葡萄糖-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、北方药学2014年第11卷第5期19HPLC法测定硫酸氨基葡萄糖相关物质N一乙酰氨基葡萄糖华阳杨宗凡(1．江苏省南通市海安县人民医院海安226600；2．中国药科大学生命科学与技术学院南京21119~摘要：目的：建立硫酸氨基葡萄糖相关物质N一乙酰氨基葡萄糖检测的HPLC法。方法：流动相为0．006mol／LH2SO；色谱柱为ShodexSugerSH1011(300mmx8mm)；流速：0．6ml／min；柱温：50oC；检测波长：202nm。结果：N一乙酰氨基葡萄糖的线性范围为0．0001-0．02mg／ml，相关系数为0．998，平

2、均回收率为99．05％，RSD为1．32％。结论：本方法专属性好、准确度高，适用于硫酸氨基葡萄糖相关物质N一乙酰氨基葡萄糖检测。关键词：HPLCN一乙酰氨基葡萄糖硫酸氨基葡萄糖中图分类号：R927．2文献标识码：A文章编号：1672—8351(2014)05—0019—01硫酸氨基葡萄糖为天然的氨基单糖，是人体关节软骨基2．4．1线性关系考察：取N一乙酰氨基葡萄糖适量，用0．O06moY质中合成蛋白聚糖必需成分。氨基单糖可刺激软骨细胞产生LH2SO溶解制成每lml约含N一乙酰氨基葡萄糖20g的溶液，具有正常多聚体结构的糖蛋白，抑制某些可

3、损害关节软骨的作为标准贮备溶液。分别取标准贮备液0．05、0．25、0．5、2．5、5、酶，抑制损伤细胞的超氧化物自由基的产生，防止皮质激素及10ml，分置10ml量瓶中，用0．006mol／LH2SO稀释至刻度，摇某些非甾体类抗炎药对软骨细胞的损害，减少损伤细胞的内匀，分别取20l按上述色谱条件进样，以峰面积(Y)对进样量毒素因子的释放，目前其主要用于治疗和预防骨性关节炎以(X，Ixg／m1)绘制标准曲线，N一乙酰氨基葡萄糖的线性范围为及食品添加剂[1。在生产过程中，由于N一乙酰氨基葡萄糖的溶0．0001~0．02mg／mt，y=1．

4、797x107x+3947．85，相关系数为0．998。解性质与氨基葡萄糖相似，故重结晶时常会出现少量N一乙酰结果表明，样品在测定量范围内峰面积与进样量之间呈良好氨基葡萄糖的残留闭，为了有效控制硫酸氨基葡萄糖生产及贮的线性关系。存过程中产生的N一乙酰氨基葡萄糖，本研究建立了硫酸氨基2．4．2稳定性实验：取供试品溶液，在“2．3”项色谱条件下操作，葡萄糖相关物质N一乙酰氨基葡萄糖的HPLC测定法，现报道分别于0、2、4、8、12、24h进样，计算RSD％为0．51。表明稳定如下。性良好。1仪器与试剂2．4．3精密度实验：取6份供试品溶液，

5、在“2．3”项色谱条件下ShimadzuLC一20A高效液相色谱仪(日本岛津制作所)，包操作，连续进样，计算RSD％为0．84。表明精密度良好。括LC一20AD泵，SIL一20A自动进样器，SPD一10A紫外检测器，2．4．4重复性实验：精密称取6份适量N一乙酰氨基葡萄糖，置墨津LC—solution色谱数据工作站。ShodexSugerSH1011色谱10ml量瓶中，加流动相适量使溶解并稀释至刻度，超声30柱(300mmx8mm)，AE240电子天平(MettlerToledo，瑞士)，rain，并用流动相补齐溶液后，0．45lxm滤

6、膜过滤，分别进样，平MD—QTMS超纯水机(Millipore，美国)，H66MC超声波清洗机均含量(％)为99．68，计算RSD％为0．17。表明重复性良好。(无锡超声电子设备公司)。2．4．5回收率实验：分别称取N一乙酰氨基葡萄糖9份(每份约N一乙酰氨基葡糖(美国Sigma—Aldrich公司)，硫酸(AR，200mg)，分别置于10ml量瓶中，分成3组，每组3个样品，再国药集团化学试剂有限公司)。分别加入0．8、1．0、1．2ml供试品溶液，加0．O06mol／LH2SO适2方法与结果量使溶解并稀释至刻度，超声30min，并用流动

7、相补齐溶液后，2．1波长的选择：取N一乙酰氨基葡萄糖适量，加0．006mol／L0．45lxm滤膜过滤，分别进样，记录峰面积，计算回收率，平均回H#O溶解制成每lml约含N一乙酰氨基葡萄糖250g的溶液，收率(％)为99．05，RSD(％)为1．32。表明回收率良好。在波长190～400nm范围内扫描。结果显示N一乙酰氨基葡萄糖3讨论溶液在202nm有最大吸收，故确定检测波长为202nm。本实验是基于对有效控制硫酸氨基葡萄糖生产及贮存过2．2供试品溶液的制备：精密称取N一乙酰氨基葡萄糖适量，置程中产生的N一乙酰氨基葡萄糖为目的而设计的，

8、实验中由于10ml量瓶中，加流动相适量使溶解并稀释至刻度，超声N一乙酰氨基葡萄糖与单糖类物质有区别，故未使用氨基柱或30min，并用流动相补齐溶液后，0．451~m滤膜过滤，使之浓度为糖柱作为色谱柱，而是使