马氏珠母贝TLR2基因cDNA的分子特征及组织表达分析-论文.pdf

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1、中回雇擘c童攉2014，30(20)：35—41ChineseAgriculturalScienceBulletin马氏珠母贝TLR2基因cDNA的分子特征及组织表达分析师尚丽，杜晓东，焦钰，黄荣莲，王庆恒，邓岳文(广东海洋大学水产学院，广东湛江524025)摘要：TLR2(tolllikereceptor2)是TLR模式识别受体家族的重要成员之一，参与有机体的免疫识别。研究采用eDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得了马氏珠母贝(Pinetadamartensii)TLR2基因(PmTLR2)cDN

2、A的全长序列并对其序列特征进行分析；同时检测7Pm弛2基因的mRNA在马氏珠母贝六个组织中的表达。结果表明：尸mTLR2基因的eDNA全长2614bp，包含41bp的5’UTR，299bp的3’UTR，23bp的polyA，开放阅读框为2274bp，编码758个氨基酸残基。多序列比对显示PmTLR2与牡蛎TLR2的序列相似性最高，为51％；Smart软件分析显示PmTLR2的蛋白序列中含有8个亮氨酸重复序列(Leucinerichrepeats，LR)，1个C端亮氨酸富集区(Leucine。richrep

3、eatC—terminal，LRR-CT)，1个N端亮氨酸富集区(Leucine．richrepeatN．terminal，LRR—NT)，1个(Toll／IL一1R)同源结构域(Tin)；荧光定量PCR分析表明PmTLR2在马氏珠母贝肝胰脏、性腺、血淋巴、鳃、外套膜和闭壳肌六个组织中均有表达，鳃中表达量最高。本研究为进一步阐述PmTLR2在马氏珠母贝免疫应答中的作用机制提供理论基础。关键词：TLR2；马氏珠母贝；基因克隆；荧光定量PCR中图分类号：$917．4文献标志码：A论文编号：2014—0839M

4、olecularCharacterizationandTissueExpressionAnalysisofPmTLR2GenefromPinctadamartens~ShiShangli，DuXiaodong，JiaoYu，HuangRonglian，WangQingheng，DengYuewen(FisheriesCollege,GuangdongOceanUniversity，ZhanjiangGuangdong524025)Abstract：Tolllikereceptor2(TLR2)isanim

5、portantcomponentintheTLRsfamily，whichisonefamilyofpathogen—associatedmolecularpatternrecognizingreceptors(PRRs)．Inthisstudy，usingrapidamplificationofcDNAendstechnology(RACE)，theauthorsobtainedthefulllengthofPmTLR2genecDNAfromPinctadamartensii(PmTLR2)．Thef

6、ulllengthofPmTLR2eDNAwas2614bp，containinga5’untranslatedregion(UTR)of41bpanda3’UTRof299bpwith27bppolyAtail．Theopenreadingframe(ORDwas2274bpencoding758aminoacidresidues．MultiplesequencealignmentindicatedPmTLR2had51％sequenceidentitywiththatfromCrassostreagi

7、gns．SMARTprogramanalysisindicatedPmTLR2containedeightLeucinerichrepeats(LRRs)，oneLeucine-richrepeatC—terminal(LRR-CrI')，oneLeucine-richrepeatN—terminal(LRR—Nr)andoneTIR(Toll／IL一1R)．Real—timePCRanalysisdemonstratedthatPmTLR2wasconstitutivelyexpressedinalls

8、tudiedtissues(adductormuscle，gonad，hepatopancreas，mantle，hemocytesandgil1)inP．基金项目：国家自然科学基因“基于珍珠贝基因组测序分析的珍珠形成矿化关键基因和蛋白质的研究”(31272635)；广东省自然科学基金“马氏珠母贝珍珠质形成相关mieroRNA的鉴定与功能研究”(S2012040008042)。第一作者简介：师尚丽，女，1977年出生，实验师，