β-胡萝卜素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用.pdf

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1、24南昌大学学报(医学版)2014年第54卷第7期JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2014，Vo1．54No．7I]；一胡萝b素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用邱模昌，蔡灵卿，王芳，刘建明，程畅河(江西医学高等专科学校药学系，江西上饶334000)摘要：目的研究p一胡萝素(p—c)对高糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制。方法在血管内皮细胞长至8o以上融合时，将其分为5组：正常对照组、高糖损伤组及低、中和高剂量Bc组，每组6个

2、复孔。正常对照组加入10葡萄糖注射液5．5mmol·L，高糖损伤组加入1o葡萄糖注射液33mmol·I，低、中和高剂量p—c组分别加入pclO、2O、40／~mol·L+10葡萄糖注射液33mmol·I。各组放置5CO。培养箱中培养48h后，收集细胞或培养液进行实验。使用酶联免疫检测仪、采用MTT比色法检测5组血管内皮细胞存活率，采用流式细胞仪检测血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中活性氧(ROS)水平，使用全自动生化仪、采用乳酸一丙酮酸连续监测法检测5组血管内皮细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性，使用

3、全自动生化仪、采用硫代巴比妥酸比色定量法检测5组血管内皮细胞培养液中丙二醛(MDA)的水平；先参照N()检测试剂盒的使用说明书进行实验，后采用酶联免疫检测仪榆测5组血管内皮细胞培养液中NO水平。结果与正常对照组比较，高糖损伤组的血管内皮细胞存活率、血管内皮细胞培养液中NO水平均明显降低，血管内皮细胞培养液中LDH活性、MDA水平，血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中R0s水平均明显升高(均P

4、细胞培养液中LDH活性、MDA水平及低、中和高剂量口一C组的血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中ROS水平均明显降低(P

5、dothelialCellDamageInducedbyHighGlucoseQIUMo-chang，CAILing-qing，WANGFang，LIUJian—ming，CHENGChang-he(DepartmentofPharmacy，JiangxiMedicalHigherSpecialistSchool，Shangrao334000，China)ABSTRACT：ObjectiveTostudytheeffectsofp—carotene(p—C)onhighglucose—induceden

6、dothelialeelldamageanditsmechanismofaction．MethodsWhencellfusionreachedmorethan80，vascularendothelialcellsweretreatedwith5．5mmol·L10glucoseinjection(controlgroup)，33mmol·I一(highglucosegroup)，10／,mol·Lt?-C+33mmol·Iglucoseinjection(1owdoset?-Cgroup)，20mol·

7、Ip—C+33mmol·Iglucoseinjection(mediumdosel3一Cgroup)，or40>mol·IC+33mmol·L～glucoseinjection(highdosep—Cgroup)．Eachgroupincludedsixwells．Afterculturefor48hoursinanincubatorfilledwith5CO，，cellsorculturemediumwerecollected．CellviabilitywasassayedbyMTTcolorimet

8、ryusingmicroplatereader．Cellapoptosisandintracellularreactiveoxygenspecies(ROS)generationweredetectedbyflowcytornetry．Theactivityoflacticdehydrogenaseinmediumwasexaminedbycontinuousmonitoringoftheconversionlacticacidtopyru