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《去甲斑蝥素诱导人红白血病K562细胞凋亡的实验研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第8卷第1期中国组织化学与细胞化学杂志Vol.8No.11999年3月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYTOCHEMISTRYmar.1999去甲斑蝥素诱导人红白血病K562*细胞凋亡的实验研究*******孙震晓赵天德魏育林李家实(山东聊城师范学院,聊城252059;**中日友好临床医学研究所***北京中医药大学中药学院,北京100029)-1摘要体外实验证明10μg.ml去甲斑蝥素作用于人红白血病K562细胞24h,可诱导K562细胞发生凋亡。提取加药组细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA“梯子”,同时加药组细胞出现核固缩
2、、碎裂及胞浆浓缩等形态学变化。流式细胞测试结合形态学观察,特别是细胞超微结构观察,证明去甲斑蝥素诱导-1的K562细胞凋亡大部分发生在细胞周期的M期,也有部分发生在间期。免疫细胞化学结果表明,10μg.ml去甲斑蝥素作用于人红白血病K562细胞24h,与对照组相比,加药组细胞中bcl-2蛋白表达增强,而Bax蛋白表达减弱,两组间有显著性差异(P<0.001)。关键词去甲斑蝥素细胞凋亡K562细胞Bcl-2BaxSTUDYONAPOPTOSISOFK562HUMANMYELOIDLEUKEMIACELLSINDUCEDBYNORCANTHARIDIN*******SunZ
3、henxiao,ZhaoTiande,WeiYulin,LiJiashi**(LiaochengTeacher'sCollege,Liaocheng252059;China-Japan***FriendshipInstituteofClinicalMedicalSciences;BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029China)-1It'sprovedthat10μg/mlNCTDcaninduceapoptosisinK562humanmyeloidleukemiacellsinvitro
4、after24h.AcharacteristicDNA"ladder"wasdetectedbyusingagarosegelelectrophoresis.SometreatedK562cellswerefoundcondensedwithnuclearchromatincom-pactionandbreakingup.ByFACSanalysisandmorphologialobservation,especiallybyul-trastructuralobservation,weprovedthatmostapoptosisofK562cellsoccurredi
5、nmitosisphaseandsomeothersinitiatedininterphaseofcellcycle.It'sfoundtheexpressionofbcl-2oncoproteinwasdecreasedwhileBaxincreasedinthetreatedK562cellsbyimmunocy-tochemicalstaining,whichwasinstrikingcontrastwiththecontrolgroup(P<0.001).KeyWordsNorcantharidin;Apoptosis;K562;bcl-2;Bax去甲斑蝥素(N
6、orcantharidine,NCTD)是在反复研究抗肿瘤活性成分斑蝥素(Canthari-dine,CA)构效关系的基础上,由呋喃及顺丁烯二酸酐经Diels-Alder反应人工全合成的一种化合物,与斑蝥素相比,缺少1、2位的两个甲基,两者立体构型相同。临床上用于治疗多种[1-3]癌症,以原发性肝癌为主,显示了较好疗效。药理实验及临床实践还表明,NCTD对正常[4,5]骨髓细胞没有抑制作用,反而有很好的升白效果,是一种抗肿瘤机理颇为独特的药物。细胞凋亡是一种有别于细胞坏死的细胞主动参与并遵循一定程序的自我消亡过程,具有*高等学校博士学科点专项科研基金资助项目第1期孙震晓
7、等.去甲斑蝥素诱导人红白血病K562细胞凋亡的实验研究93特殊的形态和生化特征。越来越多的实验表明,药物等对肿瘤细胞的杀伤作用与诱导其产生[6]凋亡有关。既然抗肿瘤药物可通过引起肿瘤细胞凋亡来发挥其治疗作用,而细胞凋亡又是一个可被抑制或激活的可调节过程,那么对药物引起细胞凋亡机制的深入研究,必有助于临床上提出新的治疗方案,使肿瘤治疗走出低谷。本文以人红白血病K562细胞为靶细胞,研究了NCTD对K562细胞的杀伤作用及其引发细胞死亡的方式,并运用细胞生物学的方法对NCTD诱导K562细胞凋亡的特点及可能机制进行了初步探讨。材料和方法1.细
