木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分步水解玉米蛋白酶解产物抗氧化活性研究.pdf

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1、2014年第27卷第6期粮食与油脂43木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分步水解玉米蛋白酶解产物抗氧化活性研究胡二坤．郭兴凤0。吴欣欣。崔会娟(1．河南职业技术学院烹饪食品系，河南郑州450002；2．河南工业大学粮油食品学院。河南郑州450001)摘要：采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉，在两种酶最佳作用务件下，对两种酶作用时间进行了研究，结果表明，采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解其酶解产物的还原力和DPPH·清除率显著提高。木瓜蛋白酶水解lh后再用碱性蛋白酶水解2h得到玉米蛋白酶解产物的抗氧化效果最好，且其酶解产物的还原力为0．725，D

2、PPH·清除率为69．6％。关键词：木瓜蛋白酶；玉米蛋白粉；碱性蛋白酶；还原力；DPPH·消除率Studyonantioxidantactivityofthehydrolyzateofcornproteinhydrolyzedbypapainandalcalase2．4LHUEr—kun，GUOXing—feng2，WUXin—xin2，CUIHui-juan2(1．CollegeofCookingandFood，Henanpolytechnic，Zhengzhou450002，Henan。China；2．CollegeofFoodScien

3、ceandTechnology，HenanUniversityofTechnology，Zhengzhou450001-Henan，China)Abstract：Inthispaper，papainandalcalase2．4LwereusedtohydrolyzeCO1TIprotein，thehydrolyzingtimewasperformedonconditionoftheoptimumparametesofalcalase2．4Landpapain．Theresultsindicatedthatthereducingpoweroft

4、hecornproteinhydrolyzatewasobviouslyimprovedwhenhydrolyzedbyfirstpapainandnextalcalase2．4L，andtheantioxidantactivityofthehydrolyzatewasthebestwhenhydrolyzedbypapainfor1hoursandbyalcalase2．4Lfor2hours，andthereducingpoweroftheCOrnproteinhydrolyzatewasO．725．andtheDPPHscavengin

5、gratewas69．6％．Keywords：papain；cornprotein；alcalase2．4L；reducingpower；DPPHscavengingrate中图分类号：TS201．2+5文献标识码：A文章编号：1008—9578(2014)06-0043—03目前多肽的酶法制备多数采用单酶水解方法，但钠、磷酸二氢钾、碳酸钠、氢氧化钠、茚三酮等试剂：均是由于单酶的酶切位点相对较少，使蛋白质的水解受为分析纯。到一定的限制；采用多种酶协同水解，可以增加蛋白1．2主要设备酶的特异性催化位点，从而提高蛋白质的水解度及722s可见光分光

6、光度计：上海精密科学仪器有限多肽产率；但是由于酶本身也是蛋白质，同时加入两公司；CHA-S气浴恒温振荡器：金坛市华锋仪器有限种不同的酶，可能引起两种蛋白酶之间的相互水解，公司：HH～s型数显恒温水浴锅：巩义市英峪予华仪或者不同蛋白酶之间产生竞争性抑制作用从而影响器厂；101-型电热鼓风干燥箱：北京市永光明医疗仪水解速度¨；而且不同蛋白酶的最佳水解条件也器厂；AY120型电子分析天平：日本岛津公司；马弗存在差异性。为了解决这个问题，通常采用分步酶炉：上海实验电炉厂；全自动凯氏定氮仪：FOSS公司解法。(瑞典)；PHS一3C型pH计：上海精密科学

7、仪器有限本文采用木瓜蛋自酶和碱性蛋白酶两种酶进行公司雷磁仪器厂。双酶分步水解玉米蛋白粉，研究双酶分步水解过程中1．3方法各酶解产物的抗氧化活性变化，确定双酶分步水解制1．3．1基本组分测定备玉米蛋白酶解产物的最佳工艺条件，为玉米蛋白的粗蛋白含量测定：凯氏定氮法GB／T5009．5-2010；进一步开发利用提供实验依据。粗脂肪含量测定：索氏抽提法GB／TI4772-2008；水1仪器与方法分含量测定：直接干燥法GB／T5009．3-2010；灰分含1．1材料和试剂量测定：直接灰化法GB／T5009．4-2010。玉米蛋白粉：郑州华冠生物技术开发

8、有限公司；1．3．2玉米蛋白酶解液制备工艺木瓜蛋白酶：南宁庞博生物工程有限公司；碱性蛋白玉米蛋白粉粉碎过80目筛一匀浆一调节酶(Alcalase)：诺维信(中国)生