苎麻ACC氧化酶基因（BnACO1）的克隆及表达.pdf

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1、中国农业科学2013，46(11)：2377．2385ScientiaAgriculturaSinicadoi：10．3864~．issn．0578—1752．2013．11．023苎麻ACC氧化酶基因(BnAO01)的克隆及表达薛丽君，周精华，邢虎成(湖南农业大学苎麻研究所，长沙410128；湖南省种质资源创新与资源利用重点实验室，长沙410128)摘要：【目的】克隆苎麻中的一个ACO基因(BnACO1)，并对其进行生物信息学分析、表达分析、胁迫应答分析。【方法】通过RT—PCR结合RACE技术从湘苎3号中克隆该基因的全长cDNA序列，利用生物信息学软件对获得的基因序列及编码的蛋

2、白质序列进行分析。利用实时荧光定量PCR分析BnACO1在苎麻不同部位的表达量以及在ABA、干旱和高盐胁迫下的应答。【结果】BnAC01的eDNA序列全长为1476bp，其开放阅读框为981bp，编码326个氨基酸多肽，预测其分子量和等电点分别为36．81kO和4．95，基因登录号为JX878855。与无花果(AB307720)、香叶天竺葵(U19856)、柿树(AB073009)、梨(JN807390)、猕猴桃(HQ293208)的ACO基因核苷酸序列相似性分别为83％、81％、79％、79％和79％，氨基酸序列的相似性分别为87％、80％、8O％、78％和83％。实时荧光定量P

3、CR分析表明苎麻BnACO1在苎麻根、茎、茎尖、叶片、雌花和雄花中均有表达，其中，在雄花中表达最高，在根、茎中表达最低，且该基因受ABA、干旱和NaC1胁迫诱导表达。【结论】获得的BnACO1是AC0家族成员之一，参与ABA、干旱、NaC1胁迫应答，该基因可能在苎麻性别分化中起到一定作用并且在调控苎麻生长发育和应对环境胁迫时具有独特的表达模式。关键词：苎麻；乙烯；ACC氧化酶；表达CloningandCharacterizatiOnofACCOxidaseGene(BnAC01)fromRamie(Boehmerianivea)XUELi-jun，ZHOUJing—hua，XING

4、Hu．cheng，(1InstituteofRamie,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128；2HunanProvincialKeyLaboratoryofCropGermplasmInnovationandUtilization,Changsha410128)Abstract：[Objective]An1-Aminocyclopropane一1一CarboxylicacidOxidasegene(BnACO1)wasclonedfromramieandanalyzedbybioinformaticsmethod．Theexpress

5、ionpa~emwasrevealedindiferentorgansandunderstresses．[Method]Thefull-lengthsequenceofACOgeneeDNAwasclonedfromXiangzhu3ramiebyRT-PCRandRACEmethods．ThenthesequenceofBnACO1geneandproteinsequenceswereanalyzedthroughbioinformaticsmeans．TherelativeexpressionlevelofBnACOlgeneinvariousorgansoframieandu

6、nderABA，drought，NaC1stresseswasexaminedbyreal-timefluorescencePCR．[Result]ThefulllengthsequenceandtheORFoftheBnACO1genewere1476bpand981bp，respectively,whichencoded326aminoacids．Themolecularweightis36．81kDandtheplis4．95．Thesimilaritycomparisonrevealedthatthegenenucleotidesequenceshared83％．81％，7

7、9％，79％，and79％ofhomologywiththeFicuscarica(AB307720)，Pelargonium(u19856)，Diospyroskaki(AB073009)，Pynlspyrifolia(JN807390)，Actinidiachinensis(HQ293208)ACOgene，andthesimilarityoftheaminoacidsequenceswiththatofthesespecieswas87％，80％，80％，78％