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1、质量人微生物检验的质量控制微生物检验的质量控制前言在实际工作中存在许多复杂因素影响微生物学检验,可能给检验结果带来偏差甚至错误,因此必须对影响检验结果的诸多因素采取控制手段保证检验结果的正确性,不断完善微生物检验的质量控制.主要内容1检验人员2仪器.设备3检验培养基,试剂4检验环境5采样6样品的接收和预处理7检验质量8校验的执行9参考菌株及其保存10实验室内外部质量控制11检验报告及结果质量控制1检验人员(1)微生物检验不能完全依赖全自动鉴定仪器,检验工作中每一步骤均需要有高度的主观分析和判断能力,与个人的经验.技能和微生物检验基础知识水平密切相关.(2)除要求微生物检验人员必须具备严肃
2、认真的工作态度,精密细致的观察和操作习惯,注重个人卫生外,还必须训练掌握微生物检验技术.(3)检验人员应执行上岗前培训制度,上岗前培训合格方能上岗操作,还要主动参加学习,培训,讲座,学习新技术,掌握微生物学检验方法,标准及相关法律法规1检验人员(4)参与编写测试程序及仪器操作程序,学习质量保证体系知识和计量学基本知识(5)参加各类水平测试和盲样测试,提高检测水平和分析问题,解决问题的能力(6)微生物学检验室负责人应定期对检验人员进行专业知识和操作熟练程度的考核,提高检验人员的素质.3培养基为保证干粉培养基质量指标，在实际工作中应注意；（1）加强包装的密封性能；（2）使用时尽量缩短开盖时间
3、；（3）一般干性培养基放在低温干燥的环境中保存，对于易受潮的品种，启用后宜放入干燥器中保存；（4）由于配制水分不同，启用次数或时间增加，干粉培养基的pH值可能会有所变化，应随时略加调整。3培养基培养基的配制应严格按照标准规定的方法进行操作，并做好原始记录。为保证培养基必须在玻璃容器，搪瓷或铝锅中进行，如用铜，铁器皿，会对微生物生长有毒害作用；配制培养基时应按检验项目规定的配方添加，不得随意增减或更改培养基成分。此外，要用专用的角匙取药品，避免交叉污染而影响检验结果；3培养基培养基配制最好用蒸馏水或去离子水，避免使用自来水，因其中含有氯等抗菌物质；不同类型的微生物对pH值的要求不同，配制培
4、养基时应测调值，如测定结果与所要求的值不符，则用1NNaOH或1NHCL溶液进行调节。3培养基效果试验是指按不同的培养基接种相应的菌株，观察细菌的发肓，菌落形状，色素，溶血等特征，据此判断培养基是否符合要求。质控菌株ATCC生长情况金黄色葡萄球菌25923+++大肠杆菌25922+++7检验质量除按国家标准方法对所需检验项目进行检测外，在实际工作中还应注意以下几个方面，否则会影响检验结果的准确性：（1）在定量检验时用重量法还是用体积法，检验结果会有误差，因为此重不等于1的样品，1ml和1g的化验结果绝不会相等.一般固态的样品宜用重量法,液体样品宜用体积法.但对粘性液体(如酸奶),如用体积
5、法,会粘附一定量的样品在吸管上,因此此类样品最好用重量法.7检验质量(2)如检样需用用无菌水或无菌生理盐水稀释,则最好用均质器或组织碎机,以8000`10000转/min的转速处理1min,制成均匀的菌悬液.(3)样品稀释时,常会滞留少量样品在吸管内外,应多加注意.吸入液体后,应沿管壁慢慢注入递增的稀释中,特别注意此时吸管尖端切不可碰到稀释液中.7检验质量(4)在培养基注入检样,菌悬液时,注意培养基温度宜在45℃ -50℃ 之间,并使培养基与检样,菌悬液充分混合.(5)微生物培养时,应根据要求选择正确的培养温度和时间.(6)应用无菌水或无菌生理盐水作空白对照,如果在空白对照中检出细菌,则
6、可认为培养基质量存在问题或在操作过程中存在污染情况.另外,采用标准菌种作阳性对照,观察培养基的质量情况.(7)整个检验过程应严格遵守无菌操作.(8)及时检查结果,做好原始数据记录.9参考菌株及其保存实验室要准备好足够种类和数量的参考菌株,满足培养基,试剂盒和试剂质量测试的需要.保存菌株要定期传代,注意无菌操作,使菌株不污染,不死亡,不丢弃.应设专人妥善保管,菌株保存箱应加锁放置适宜环境,取出使用应登记;保存菌株应建册登记,基本项目应包括菌种名称,分离来源,分离日期,传代日期,保存方法,主要性状,保管者,领用者等;对保存菌种,经传代数次后应进行一次系统生化反应,血清学期成绩特性等生物学性状
7、观察,检查其是否发生变异.9参考菌株及其保存常见的参考菌株保存方法：细菌(1)营养要求不高的需氧细菌在胰胨大豆琼脂斜面上能存活1年.(2)需氧或厌氧菌的长期储存需冷冻干燥,或存放在-70℃(3)营养要求不高的冻干菌种每隔5年要解冻分离重新冻干.(4)细菌低温冰冻保存时可悬浮于消毒去脂牛奶,含15%甘油的胰胨大豆肉汤或无菌马血中.9参考菌株及其保存真菌(1)酵母菌按营养要求不高的细菌同样处理.(2)霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂斜面上4℃储存
