检测血清抗核小体抗体水平在sle诊断及转归中的研究

《检测血清抗核小体抗体水平在sle诊断及转归中的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

　　检测血清抗核小体抗体水平在SLE诊断及转归中的研究【关键词】抗核小体抗体；红斑狼疮；系统性；皮肌炎［摘要］目的:研究血清抗核小体抗体(AnuA)水平监测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定62例SLE，52例亚急性皮肤型红斑狼疮（SCLE），10例皮肌炎和30例健康人血清AnuA水平，采用SLE疾病活动指数0.05)。AnuA水平与SLEDAI有明显相关性（P=0.015,r=0.441），SLE患者治疗后血清AnuA水平与治疗前相比明显降低（P<0.05）。结论：AnuA水平高低对诊断SLE、监测病情活动和判断疗效有意义。　　［关键词］抗核小体抗体；红斑狼疮；系统性；皮肌炎　　ExaminetheLevelofAntinucleosomeAntibodyinBloodSerumintheDiagnosticsofSystemicLupusErythematosusandTheResearchinethelevelofAntinucleosomeantibody(AnuA)inbloodserumtodiscoverthevalueinthediagnosticsofSystemicLupusErythematosus(SLE)andparetheresultsfrombeforeandaftertreatmentsrespectively.MethodsEnzymelinkedimmunosorbantassay(ELISA)from62samplesofSLE,52samplesofSubacuteCutaneousLupusErythematosus(SCLE),10samplesofDermatomyositisand30healthysamples,respectively.Inordertodetermineandgradethecriterionofstateofillness,theSystemicLupusErythematosusActivityIndex(SLEDAI)hasbeenadopted.ResultsThelevelsofAnuAinserumfromtheSLEsamplesthesamplesofatomyositispatientsandhealthyspecimens(P<0.01).ThelevelsofAnuAinserumfromtheactiveSLEsamples,thataremuchhigherthanthatfromthesamplesatomyositissamplesandthehealthyones(P<0.05).Thedifferencebetdermatomyositisandhealthysampleshasnotgotanystatisticsignificance(P>0.05).ThereisapparentpertinencebetremarkablyreducedentshadbeengiventoSLEpatientsparingents(P<0.05).ConclusionThelevelsofAnuAisvalidtohelptodiagnosetheSLE,monitorthediseaseandestimatethecurativeeffect.　　Keyeantibody；LupusErythematosus；Dermatomyositis；Systemic 系统性红斑狼疮（SLE）是一种临床比较常见的自身免疫性结缔组织病。核小体是染色质的基本单位，在细胞凋亡过程中，核酸内酶活化后切割核染色质释放出核小体，核小体是靶抗原，诱导抗核小体抗体（AnuA）的产生［1］，通过研究发现，SLE患者体内存在大量的抗核小体抗体，我们采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测SLE、SCLE、皮肌炎和健康人血清中AnuA水平的变化，了解和研究AnuA在SLE诊断中的作用及与病情活动性的关系和治疗前后的变化。　　1资料　　1998年1月至2005年6月我院门诊及住院病人确诊SLE、SCLE患者114例，女107例，男7例，年龄11岁~70岁，平均年龄31岁；病程30d~9.5a，平均2a。其中SLE62例。根据其临床表现及实验室的检查指标，进行SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分，活动期36例，非活动期26例；SCLE52例。诊断依据美国风湿病协会1982年修订的SLE分类标准，皮肌炎10例，其中女7例，男3例，年龄20岁~58岁，平均36岁，病程46d~3a，平均1a。正常人对照组30例，为健康献血者，其中男2例，女28例，年龄18岁~45岁，平均26岁。有的住院病人经治疗后病情缓解后再次采血复查。　　2方法　　2.1仪器和试剂DrganonTekika公司生产的酶标检测仪，德国欧蒙医学实验诊断有限公司生产的抗核小体IgG抗体ELISA试剂盒。　　2.2ELISA法检测血清AnuA微孔板用小牛胸腺纯化的天然核小体包被，血清标本用标本缓冲液1∶201稀释。按加样方案向相应微孔分别加标准血清、阳性对照、阴性对照和稀释后血清各100μl，室温温育30min，缓冲液清洗3次，滴加100μl酶结合物(过氧化物酶标记的兔抗人IgG)室温温育30min，清洗3次，滴加100μl色原/底物液室温避光温育15min，加终止液终止反应。加完终止液后30min内酶标检测仪450nm比色，分别以3份标准血清的浓度和其吸光度为横、纵坐标作标准曲线，据此求出血清抗体的浓度。因尚无AnuA的国际参考血清，标准品以相对单位（RU）表示。德国欧蒙医学实验诊断有限公司推荐以20Ru/mL为正常上限，高于此值则为阳性。　　2.3疾病活动性评分治疗前后采血的同时，记录患者的临床表现及实验室检查指标，进行SLEDAI评分，对SLE的疾病活动性作总体评估。　　2.4统计学处理采用SPSS统计软件包11.0进行统计学分析，计量资料以±s表示，组间计量资料比较采用单因素方差分析，治疗前后比较采用配对t检验，SLE患者的AnuA水平与SLEDAI的相关性采用Pearson相关检验。当P<0.05时为有统计学意义。　　3结果 　　3.1血清AnuA定性检测结果62例SLE患者中有36例AnuA阳性，阳性率为58.1%,36例活动期SLE患者病人中28例AnuA阳性,阳性率为77.8%,26例非活动期SLE病人中有8例AnuA阳性,阳性率30.8%,其余62例结缔组织病患者(52例SCLE、10例皮肌炎病人)，只有4例SCLE病人为阳性，30例正常人对照组均为阴性。　　3.2SLE、SCLE病人血清AnuA水平见表1。　　表1结缔组织病病人与正常人血清AnuA水平比较（略）　　表1,SLE活动期患者血清AnuA水平与SLE非活动期、SCLE、皮肌炎和正常人对照组相比差异均有统计学意义（P<0.05）;SLE非活动期患者血清AnuA水平与SCLE,相比差异无统计学意义（P>0.05）,与皮肌炎和正常人对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);SCLE患者血清AnuA水平与皮肌炎和正常人相比差异有统计学意义(P<0.05);皮肌炎患者和正常人对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。　　3.3AnuA与SLE疾病活动性的关系对SLE患者的AnuA水平与SLEDAI进行分析，结果表明，AnuA水平与SLEDAI有相关性（γ=0.441,P=0.015）。　　3.4SLE、SCLE患者治疗前后AnuA水平的动态变化。　　表250例SLE、SCLE病人治疗前后血清AnuA水平比较（略）　　30例SLE病人经住院治疗2周至1个月后,病情缓解,SLEDAI明显降低.与治疗前相比,AnuA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);20例SCLE病人经治疗10d后,病情好转,但治疗前后血清AnuA水平差异无统计学意义(P>0.05)。　　4讨论　　有资料表明SLE病人淋巴细胞凋亡明显增加,导致大量核小体释放［2］，核小体作为免疫原,可被抗原提呈细胞如单核细胞提呈给CD4Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生AnuA,形成抗原抗体复合物参与SLE的发病［3］。有学者研究了不同结缔组织病病人抗核小体IgG抗体的分布,表明它们只出现于SLE和混合性结缔组织病。高水平的抗核小体IgG抗体几乎只是在SLE中出现［4］。我们的实验结果表明SLE活动期病人血清AnuA水平与SLE非活动期SCLE、皮肌炎患者和正常人对照组相比明显升高，SLE非活动期SCLE病人血清AnuA水平与正常人对照组相比有所升高，而皮肌炎病人血清AnuA水平与正常人对照组近似。因此我们认为AnuA的检测对SLE、SCLE，特别是对SLE的辅助诊断具有一定的临床应用价值。 　　本实验结果显示AnuA水平与SLE疾病活动有相关性，动态检测发现SLE病人治疗后血清AnuA与治疗前相比明显降低，说明通过监测AnuA水平可以判断SLE病人对药物治疗后的反应。SCLE病人治疗后血清AnuA平均水平与治疗前相比绝对值有降低，但无统计学意义，分析认为SCLE病人治疗前后血清AnuA水平稍高于正常，治疗前后检测采血时间间隔较短，是治疗前后的差异无统计学意义的原因。今后治疗前后检测采血应延长间隔时间。　　参考