欧亚旋覆花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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1、欧亚旋覆花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究【摘要】目的观察欧亚旋覆花总黄酮（totalflavonesextractedfromInulabritannicaL，TFIB）对大鼠局灶性脑缺血-再灌注脑组织损伤的保护作用，并进一步探讨其作用机制。方法采用大脑中动脉栓塞法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，缺血2h，再灌注22h后，以盐酸2,3,5三苯基四氮唑（TTC）染色法测定脑梗塞面积,比色法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用“5分法”进行神经症状评分。结果TFIB(25，50，100mg·kg

2、-1，ip)能明显改善脑缺血-再灌注后大鼠神经症状,明显减小梗塞面积与全脑面积之比，提高缺血脑组织SOD活性，降低MDA含量。结论TFIB对大鼠缺血-再灌注损伤大脑具有显著的保护作用,其作用机制可能与TFIB抗氧化作用有关。【关键词】欧亚旋覆花总黄酮；脑缺血再灌注；抗氧化　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsoftotalflavonesextractedfromInulabritannicaL.(TFIB)oncerebralischemia-reperfusioninjuryinra

3、tsanditsmechanism.MethodsThemodeloffocalreperfusioninjuryaftercerebralischemiainratsadebymiddlecerebralarteryocclusion.For2h,follochloride.Spectrophotometricassayinetheactivityofsuperoxidedismutase(SOD)andthecontentofmalondialdehyde(MDA)inbraintissue.Neurologicaldeficit.ResultsTFI

4、B(25,50,100mg·kg-1,ip)significantlydecreasedneurologicaldeficitscoresandreducedthepercentageofinfarctionintheipsilateralhemisphereparedodelgroup.TFIBsignificantlyincreasedSODactivityanddecreasedMDAcontent.ConclusionTFIBprovidessignificantprotectionagainstcerebralischemia-reperfusi

5、oninjuryinrats.　　KeyInulabritannicaL.;Cerebralischemia-reperfusion;Antioxidantaction　　缺血性脑损伤是以微循环下降为特征的神经系统疾病。临床上脑缺血发生后,大部分患者还有血流再灌注现象发生,当血流再灌注时会产生大量的自由基,导致体内脂质过氧化反应,形成一系列的脂质自由基及其降解产物。这些脂质自由基将进一步引起膜的流动性降低、通透性增高、线粒体肿胀、溶酶体损坏及释放。因此,自由基损伤比单纯脑缺血损伤更加严重［1］。现有的许多钙拮抗剂只能治疗单纯脑缺血损伤，而对再灌注损伤无很好

6、地治疗作用。研究证明自由基清除剂和抗氧化药物可以减轻缺血性脑损伤，产生神经保护作用［2，3］。黄酮类化合物具有清除自由基和抗应激反应的能力。欧亚旋覆花含有槲皮素、木犀草素、槲皮苷等多种黄酮类化合物，具有抗氧化活性［4，5］。然而有关欧亚旋覆花总黄酮(totalflavonesextractedfromInulaBritannicaL.,TFIB)对脑缺血-再灌注损伤的作用,目前尚无报道。本实验采用大鼠大脑中动脉梗塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,观察TFIB对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤大脑的保护作用。　　1材

7、料　　1.1药品与试剂欧亚旋覆花总黄酮提取物（自制）；SOD及MDA试剂盒(南京聚力生物医学工程研究所）；2,3,5-三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltet2razoliumchloride,TTC),其他试剂为进口或国产分析纯。　　1.2动物健康雌性SD大鼠，体重230～270g，由河北医科大学实验动物中心提供，清洁II级，动物合格证号：冀医动字第06057号。　　2方法　　2.1欧亚旋覆花总黄酮的制备取欧亚旋覆花适量加10倍量水，回流提取3次，1h/次，合并提取液浓缩；然后用AB-8大孔吸附树脂柱富集，提取物上样浓度为0.2g/ml，用70

8、%乙醇进行洗脱，冷冻干燥，测得总黄酮含量为89.5%。　　2.2M