肿瘤浸润淋巴细胞在人黑色素瘤组织中的形态学观察

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1、肿瘤浸润淋巴细胞在人黑色素瘤组织中的形态学观察作者：谢遵江，贺业春，贾立敏，刘颖，刘丽，郑金华【摘要】目的探讨人黑色素瘤组织中肿瘤浸润淋巴细胞（tumorinfiltratinglymphocyte，TIL）的形态学特征。方法采用光镜、透射电镜和免疫组化方法观察9例人皮肤黑色素瘤组织中TIL的分布及形态变化。结果肿瘤浸润淋巴细胞主要分布在癌周区，病变早期，TIL数量多、集中分布；病变晚期，TIL数量少、散在分布。病变早期TIL数量明显高于病变晚期（P<0.01）。电镜下，可见肿瘤浸润淋巴细胞核大，胞质少，核较圆。TIL与肿瘤细胞有接触。

2、结论本试验提示黑色素瘤组织中TIL数量多少与肿瘤的进展有关。TIL与肿瘤细胞关系密切。【关键词】黑色素瘤；肿瘤浸润淋巴细胞；形态学【Abstract】ObjectiveTostudythemorphologicalcharacteristicsoftumorinfiltratinglymphocytes(TIL)intumortissueofhumanmelanoma.MethodsThedistributiveandmorphologicalchangesofTILicroscopy，electronmicroscopyandimmunoh

3、isochemistry.ResultsTILmainlyappearedinthetumor-surroundingtissue.ThenumberofTILoreandconcentrateddistributionintheearlierstage，butitberofTILuchmoreintheearlierstagethaninthelaterstage(P<0.01).Underelectronmicroscope，thenucleusofTILofTILorcell.ConclusionThenumbersofTILar

4、erelatedtotheprogressoftumor.Thereisacloserelationshipbetorcell.【Keyelanoma；tumorinfiltratinglymphocyte；morphology肿瘤浸润淋巴细胞（tumorinfiltratinglymphocyte，TIL）是以T细胞为主的一个异质性淋巴细胞群体。有关TIL的研究多集中在肿瘤生物学治疗方面，以及在肿瘤组织中的浸润程度对肿瘤病人生存预后影响的研究［1］，但对有关TIL的形态学研究较少。本文通过CD3在黑色素瘤组织中的表达和电镜方法对人黑色素瘤组

5、织中浸润淋巴细胞的形态进行研究，为研究TIL的功能提供形态学基础。1材料与方法1.1试验材料人黑色素瘤标本9例，取自早晚期不同的病变阶段的手术病人。由哈尔滨医科大学附属第一、第二医院提供。根据临床表现和病理特征及临床病理诊断，将黑色素瘤分为病变早期（5例）和病变晚期（4例）两部分。1.2取材方法根据病人病情（早、晚期），临床手术切取黑色素瘤新鲜组织标本，当即以双馏水清洗，再以0.2mol/L磷酸缓冲液冲洗，取黑色素瘤组织，一部分经10%福尔马林液固定，制成石蜡切片，HE染色；另一部分经3%戊二醛固定，电镜样品制备，光镜和电镜观察。1.3免疫组

6、织化学方法黑色素瘤周组织经4%福尔马林液固定后，制成4μm石蜡切片。切片经脱蜡后用PBS漂洗，一抗采用兔抗人CD3抗体（武汉博士德生物工程有限公司），二抗采用山羊抗兔IgGSABC试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司），按使用说明书程序操作。1.4常规透射电镜观察常规透射电镜样品制备，透射电镜观察。1.5统计学方法对病变早期和晚期CD3免疫组化染色切片进行观察，选择CD3阳性细胞最多处，观察5个高倍视野（×40）进行阳性细胞计数，并进行统计学处理。2结果2.1免疫组化（CD3）观察每例标本均可见CD3阳性细胞，主要分布在乳头层和癌周围及癌巢内。

7、CD3表达在T淋巴细胞上。被染成棕黄色的TIL呈圆形，胞浆少，核大，其分布均匀、密集。在病变早期，TIL数量多，以集中分布为主。病变晚期，TIL数量少，多数散在分布，少数呈集中分布。通过在病变早期（72.31±5.64）和晚期（23.72±4.53）TIL数量的比较，两者之间差异有非常显著性，P<0.01。2.2透射电镜观察癌早期，TIL分布范围广，数量多，聚集成堆。TIL形态不规则，但大体可分成两种：一种具有一般淋巴细胞的典型构造，核大，异染色质致密呈块状，核型较圆，胞浆少，除游离核糖体、线粒体外，其他细胞器较少；另一种TIL核呈圆形

8、，或一侧凹陷成肾形及不规则形，胞浆较多，内有丰富内质网、溶酶体、线粒体及颗粒，呈活化状态，趋于浆细胞化。TIL还彼此接触。TIL呈环状包绕癌细胞，且TIL与癌细胞密