虎杖苷单体对急性病毒性心肌炎的影响

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1、虎杖苷单体对急性病毒性心肌炎的影响【摘要】目的探讨虎杖苷（PD）对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠心肌微血管密度(MVD)的影响及对心肌的保护作用。方法120只Balb／c雄性小鼠随机分为4组：正常对照组、CVB3感染组、CVB3感染加PD治疗组和PD对照组，分别在实验的第3、7、10、14、21、30天处死动物，留取血清和心肌标本，PFU法测定心肌组织内感染性病毒颗粒，免疫组化检测心肌CD34表达，显微镜下计数心肌组织MVD。结果与正常对照组比较，感染组小鼠MVD计数增加(P＜0.05)；与感染组比较，PD治疗组小鼠心肌组织内病毒滴度明显低于感染组（P＜0

2、.05）；MVD计数显著增高，死亡率显著降低(P＜0.05)。结论PD可以明显减轻病毒性心肌炎时心肌病理损害,其保护作用可能与抗CVB3病毒和使心肌MVD增高有关。【关键词】虎杖苷柯萨奇B3病毒病毒性心肌炎MVD【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheregulationeffectofPDontheMVDofmyocardia1tissueandtheeffectofPDonviralmyocarditisinvivo．MethodsOnehundredandtaleBalb/cmicelydividedintofourgrou

3、ps：normalcontrolgroup，theCoxsackievirusB3(CVB3)infectedgroup，theCVB3infectedandPDtreatedgroup，PDcontrolgroup．Theyandcardiacmuscleingassay.TheCD34immunohistochemicalstudiesandmedicalimagineanalysised．ResultsMarkedlyincreasedmicrovesseldensityyocardialtissueofinfectedmiceinparisonicei

4、ceent.Markedlyincreasedmicrovesseldensityortalityprovedtheseverityofmyocardiallesionsinviralmyocarditis.ThetherapeuticeffectofPDmightbemediatedthroughresistingCVB3andmarkedlyincreasedmicrovesseldensity．【Keyyocarditis，microvesseldensity病毒性心肌炎(viralmyocarditis，VMC)是临床常见的心脏疾患，发病率有逐年增高的

5、趋势，但西医缺乏对本病的有效治疗药物。近几年来中药虎杖苷（PD）在防治冠心病方面取得了明显的效果。也有PD提取液具有抗CVB3病毒的作用的报道［1］，但无PD单体治疗VMC的相关报道。本实验旨在分析心肌病理改变与MVD之间的关系，探讨PD单体对VMC的影响。1材料与方法1.1材料CVB3病毒Nancy株购自山东省医学科学院，经Hela细胞培养扩增后，冻融3次，上清液分装，测得半数组织感染率（TCID50）为106/ml，小量分装后-80℃保存备用；Balb/c小鼠购自解放军第一军医大学实验动物中心，SPF级，雄性，2～4周龄，体重12～18g，共120只；虎杖

6、苷由第一军医大学病理生理教研室提供；RabbitantiCD34购自美国NeueiBiotechCo.,Ltd公司。1.2心肌炎模型的制备和分组将小鼠随机分为4组：感染组30只和PD治疗组30只，每只腹腔接种0.1mlTCID50为106/ml的CVB3病毒液；正常对照组30只和PD对照组30只，每只腹腔接种0.1ml不含CVB3的Eagle’s液。病毒接种日为0d。PD治疗组从接种病毒稀释液3d后、PD对照组从接种Eagle’s液3d后，每日尾静脉注射0.2mmol/L的PD0.1ml，连续7d；正常对照组和感染组均每日尾静脉注射0.1ml生理盐水，连续7d

7、。1.3标本留取分别在接种后的第3、7、10、14、21、30天，每组随机抽取5只小鼠经眼球采血后断颈处死并留取心脏。将血离心后分装血清于-80℃冻存，无菌条件下取心脏，称重。一半用于病毒滴度测定，一半置4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm连续切片，备做HE染色和免疫组化。1.4检测项目1.4.1光镜下观察：10％甲醛固定，石蜡包埋，组织切片，HE染色后作组织病理学检查。心脏坏死的范围和细胞浸润范围用对照双盲法评分。心肌病理评分标准：0级：无心肌损害；1级：1或2个小病灶；2级：数个小病灶；3级：多个小病灶或严重的大病灶；4级：多个大病灶，弥漫性浸润或坏死。

8、1.4.2病毒滴定：采用国际通用的病毒