护心颗粒中人参和三七的皂苷成分的提取工艺研究

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1、护心颗粒中人参和三七的皂苷成分的提取工艺研究【摘要】目的研究用乙醇溶液提取护心颗粒中人参和三七皂苷成分的工艺条件。方法以提取物中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的含量为评价指标，选择乙醇浓度、醇与药材量之比、提取时间及提取次数等为影响因素，进行L9(34)正交实验，优化提取人参和三七皂苷成分的工艺条件。结果乙醇溶液提取人参和三七皂苷成分的最佳工艺条件为用10倍量于药材的70%的乙醇溶液提取3次,每次提取2h。结论乙醇溶液提取人参和三七皂苷成分的工艺条件合理可行。【关键词】人参皂苷;三七皂苷;乙醇浸膏;护心颗粒;正交实验法　　Abstract：Ob

2、jectiveToinvestigatetheextractionconditionofginsenosideandnotoginsenosidefromRadixetRhizomaofGinsengandNotoginsenginHuxingranulesedicinematerial,theprocesstimeandtherepeattimesofextractionumconditionsofextractionedicinematerial10:1,refluxingfor2hrs,andrepeat3times.ConclusionThe

3、optimumconditionofextractionissteadyandfeasible.　　Keypo色谱数据工作站;USC-320D型超声波清洗器(上海波龙电子设备有限　公司);电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏试验设备有限公);BS224S型电子天平[北京赛多利斯(Sartorius)仪器系统有限公司];R501型旋转蒸发仪(上海中科机械研究所)。　　1.2材料生晒参产地吉林，三七产地云南，广州康美药业股份有限公司供应，并经刘茂贵主任中药师鉴定，分别为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.和五加科植物三七Panaxnotogin

4、seng(Burk.)F.H.Chen.的干燥的根及根茎，符合《中国药典》[5]各药项下的规定。乙腈(色谱纯，DIMA科技公司);乙醇(医用级，广东省广宁县葡萄糖药业有限公司);对照品三七皂苷R1(批号0745-200007)，人参皂苷Rg1(批号110703-200424)和人参皂苷Rb1(批号110704-200318)，均由中国药品生物制品检定所供应;其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1正交实验设计根据预试验和文献报道[6～9]，选取乙醇浓度、溶剂与药材用量之比、提取时间、提取次数等4个影响因素，每个因素选3个水平，按表1设计L9(3

5、4)正交实验。　　2.2乙醇浸膏的提取按照表2安排的实验条件，精密称量按处方比例混合的人参和三七药材粉末45g，加入计算量和规定浓度的乙醇溶液，回流提取规定的时间和次数后，合并提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩近干，得稠膏。用70%乙醇溶液解稠膏，转移至250ml容量瓶中并稀释至刻度。每个实验重复两次。精密量取上述浸膏的70%乙醇溶液10ml，置蒸发皿中，于水浴上蒸发至干，残留物用甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，经0.45μm滤膜过滤;精密量取10μl，注入高效液相色谱仪，按　　“2.3.1”项下的条件，测量三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和

6、Rb1的峰面积。计算3种皂苷的质量分数，3种皂苷的质量分数之和;以两次试验的3种皂苷的质量分数之和为综合评分指标，每个水平对应的综合评分值之和K1、K2、K3，极差值R，列于表2。方差分析结果见表3表3方差分析方差离差平方和(SSi)自由度(ν)方差(MS)F值显著性　　2.3三七皂苷R1、人参皂苷Rb1和Rg1的含量测定　　2.3.1色谱条件色谱柱为kromasilC18柱(4.6mm×250mm,5μm);以乙腈为流动相A，水为B，进行二元线性梯度洗脱：0～20min，20%A∶80%B;20～30min,(20%～35%)A∶(80%～65%)

7、B;30～60min，(35%～20%)A∶(65%～80%)B。检测波长203nm;流速为1.0ml·min-1;柱温为室温。　　2.3.2对照品混合溶液的制备精密称取对照品三七皂苷R12.0mg、人参皂苷Rg15.0mg和人参皂苷Rb14.7mg，置5ml量瓶中，用甲醇使溶解，稀释至刻度，摇匀，制备成对照品混合溶液。　　2.3.3线性关系考察精密称取对照品混合溶液2，4，8，12，16，20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积积分值为纵坐标，进样量(μg)为横坐标绘制标准曲线。三七皂苷R1在0.80～8.00μg，人参皂苷Rgl在2.0

8、0～20.00μg，人参皂苷Rb1在1.88～19.80μg之间呈良好的线性关系。其回归方程分别为：　　三七