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《益气化淤中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶c蛋白表达的影响的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、益气化淤中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C蛋白表达的影响的论文【摘要】 目的观察益气化淤中药对大鼠胃癌前病变胃黏膜蛋白激酶c（pkc）表达的影响。方法采用mnng、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模型成功后，将造模存活大鼠随机分为自然恢复组，中药高、中、低剂量组,各组大鼠作相应的处理后,免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织pkc表达水平。结果各治疗组pkc表达较自然恢复组下调,有显著性差异(p<0.05)。结论益气化瘀中药可能是下调pkc的表达，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，而发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用。【关键词】胃癌前病变蛋白
2、激酶c益气化淤中药 effectofyiqihuayurecipeontheexpressionofproteinkinasecinratseientofmedicine,xianningmedicalcollege,xianning437100，china； 2.departmentofphotomedicine,southchinanormaluniversity,guangzhou510631，china abstract：objectivetoobservetheeffectofyiqihuayurecipeont
3、heexpressionofproteinkinasec(pkc)inratsethodsthemodelofgplainlythroughn-methyl-n-nitron-nitrosoguanidine(mnng)togetherulationandunduehungerandovereating.thesurvivedratsaftermodelinglydividedintospontaneousrecovery,andhigh-,moderate-andloent,theexpressionofpkcmunohist
4、ochemicalmethod.resultstheexpressionofpkcineachtreatmentgroupentofratsnng)为fluka公司产品，每周用双蒸水配成1g/l的母液4℃避光储存，临用时用双蒸水配成所需浓度；脱氧胆酸钠购自湖北省医药公司；雷尼替丁由杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司生产；pkc小鼠抗大鼠单克隆抗体为santagruz公司产品；生物素化山羊抗小鼠igg(二抗)、辣根酶标记链亲合素(三抗)、dab、封闭用山羊血清等为博士德试剂公司产品。益气化淤中药主要由太子参、石斛、三七、郁金、白花
5、蛇舌草等组成，浓度2g／ml。 1.2造模及给药方法医学 选用spf级6周龄sd♂大鼠62只，体质量100～120g。造模参照严茂祥等［2～6］综合造模方法并加以改进。大鼠自购进后适应性喂养1d。从62只大鼠中随机抽取13只作为正常组,其余49只用于造模。正常组大鼠不做任何处理；造模大鼠每日自由饮用100mg/lmnng液(饮料瓶用油漆涂黑避光)、进食含0.3g/l雷尼替丁的纯鼠饲料、上午用56℃150g/l的氯化钠液按10ml/kg灌胃，进食2d，禁食1d，进食当天下午用8.5g/l脱氧胆酸钠溶液按10ml/kg灌胃。禁食
6、当天下午用400ml/l乙醇按10ml/kg灌胃，连续24周。24周末时随机抽取正常组和造模大鼠各1只，杀检，观察组织病理学变化(以he染色光学显微镜下观察的结果为主)，确认模型是否成功。 造模型成功后，将造模存活的48只大鼠随机分为自然恢复组12只。中药高、中、低剂量组(简称高、中、低剂量组)各12只。高剂量组每日每只按20g/kg(相当于成人1d用量的两倍)灌胃，中剂量组按10g/kg(相当于成人1d用量)灌胃，低剂量组按5g/kg(相当于成人1d用量的50%)灌胃。上述治疗16周。自然恢复组同正常组大鼠常规饮食。40周末
7、所有动物禁食1d，处死，剖腹取胃，沿胃大弯剪开，生理盐水冲洗，肉眼观察，平铺于硬纸板上，于胃窦部剪取组织1块，40g/l多聚甲醛固定，石蜡包埋,切片5μm,免疫组织化学染色。 1.3pkc蛋白表达pkc一抗稀释倍数(1∶100)，染色步骤如下:切片脱蜡入水。3%h2o2室温孵育1min,以灭活内源性酶。最后蒸馏水洗3次。将切片浸入tab(0.05mol/l，ph7.4)中,电炉加热至100℃,持续30min。冷却后进行下一步。滴加抗原修复液,室温孵育10min，蒸馏水洗3次。滴加正常5%山羊血清封闭液,室温孵育10min，甩去
8、多余液体。滴加稀释的一抗,4℃湿盒内过夜。tab洗涤3次,每次5min,滴加二抗室温孵育30min。tab洗涤3次，5min/次，滴加三抗(high-sabc)室温孵育30min。tab洗涤3次，5min/次，dab显色。自来水冲洗，苏木复染，封片。 1.4观
