糖尿病大鼠膀胱收缩功能改变与m3受体关系的实验研

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1、糖尿病大鼠膀胱收缩功能改变与M3受体关系的实验研【摘要】目的探讨糖尿病性膀胱发病机制中逼尿肌M3受体的改变情况。方法以链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠成模。应用尿动力仪检测逼尿肌收缩功能；3受体含量。结果病程2周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力增加伴M3受体表达增强；病程4周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力低于正常对照组，但尚无统计学意义；病程12周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力降低伴M3受体表达减少。结论膀胱收缩功能和M3受体蛋白含量及M3受体mRNA的含量三者呈同向变化关系。在糖尿病大鼠发病早期三者均升高，但是随着病程进展却都降低了。这可能是早期糖尿病性膀胱病变的发病机制之一。　　【关

2、键词】糖尿病性膀胱；逼尿肌；收缩功能；M3受体　　AlterationofdetrusorcontractionandM3subtypemuscarinicreceptorsinthetype2diabeticraturinarybladder　　【Abstract】ObjectiveToresearchintothealterationofdetrusorcontractionandM3subtypemuscarinicreceptorsinthediabeticcystopathy(DCP).MethodsThetype2diabeticratsg/kg)andhighcalo

3、ricdiet.Theidentical-inationofM3muscarinicreceptormRNAinthebladdertissue,themethodofRT-PCRployed.TheamountofM3receptorproteinintheratbladderbodytissueeasuredbythemethodof3muscarinicreceptormRNAinthe4-ountofM3muscarinicreceptormRNAinthe12-onstratedthattheamountofM3muscarinicreceptorproteininthe

4、2-uscarinicreceptormRNAandM3subtypemuscarinicreceptorsproteininthetype2diabeticraturinarybladderilar.Attheearlystageofdiabetesmellitus,Hoellitusisdeveloped,allofthreefactorsaredecreased.　　　　【Keyuscarinicreceptors糖尿病性膀胱（diabeticcystopathy，DCP）是糖尿病最常见的慢性并发症之一，虽然其临床表现和严重危害早已被人们所认识，但其发病机制仍未阐明，故早期诊

5、治比较困难。本实验研究2型糖尿病大鼠膀胱逼尿肌收缩功能改变和M3受体及M3受体mRNA的含量改变的关系，以期为阐明DCP的发病机制提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1材料动物模型与分组：新生雌性g/ml链脲佐菌素（steptozotocin，STZ）溶液按90mg/kg体重剂量腹腔注射一次，待4周龄断乳时再以200mg/mlSTZ25~30mg/kg体重腹腔注射追加一次，并以高糖高脂饮食（18%猪油；20%蔗糖，3%蛋黄粉、59%基本饲料）饲喂。8周龄时以空腹尾静脉血葡萄糖浓度>11.1mmol/L为模型成功。正常对照组：不作特殊处理。两组均自由进食进水。3组分别于饲养1

6、0、12、20周时，即糖尿病病程2周、4周、12周时进行实验。　　1.2方法　　1.2.1离体全膀胱制备腹腔注射乌拉坦100mg/kg麻醉后仰卧位固定大鼠,取下腹正中切口，结扎双侧输尿管，远离膀胱颈部离断尿道，完整取出膀胱，置于37℃、pH7.4、充氧(95%O2，5%CO2)的Tyrodes液中(NaCl125mmol/L，KCl2.7mmol/L，CaCl21.8mmol/L，NaH2PO40.4mmol/L，MgCl20.5mmol/L，NaHCO324.0mmol/L，葡萄糖5.6mmol/L)备用。　　1.2.2离体全膀胱收缩功能实验取一硬膜外导管,一端经尿道插入离体膀胱

7、并妥善固定；另一端经三通管分别连接微量灌注泵和尿动力仪,作膀胱灌注和测压之用，全部实验过程在37℃、pH7.4、充氧(95%O2，5%CO2)的Tyrodes液中进行。首先将离体膀胱温育平衡30min，接着以0.2ml/min的速度用生理盐水进行膀胱灌注。膀胱最大容量的测定：恒速灌注,当膀胱压力上升达到前10min压力的2倍以上时记录容量，记为膀胱最大容量。排空膀胱后静置15min。Tyrodes液中加入1mmol/LCarbachol再次进行恒速灌注，当达到最大膀胱