苦玄参药材有效成分含量积累动态的研究论文

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1、苦玄参药材有效成分含量积累动态的研究论文.freel。结果苦玄参中苦玄参苷ⅠA的平均含量从当年6月份到次年1月份分别为0.25%，0.36%，0.36%，0.22%，0.16%，0.16%，0.07%，0.05%，以7、8月份含量较高。结论所建立的含量测定方法灵敏度高，专属性强，重复性好，以药材中苦玄参苷ⅠA的含量高低为标准，苦玄参最佳采收时间应为当年7、8月份。【关键词】苦玄参苦玄参苷IA高效液相色谱法积累动态苦玄参，又名苦草、蛇总管，为玄参科植物苦玄参Picriafel-tarraeLour的干燥全草，产于我国广

2、西、广东、云南和贵州等地，该药已收载于《广西中药材标准》1990年版。苦玄参为一年生草本植物，在广西民间作为药用已有很长的历史，其性寒味苦，主治风热感冒、咽喉肿痛、痄腮、疖肿、泄泻痢疾、痔疮、湿疹，毒蛇咬伤、跌打损伤等，具有清热解毒，凉血消肿之功效［1］。本实验研究将为确定广西苦玄参药材的最佳采收期，深入研究该药材质量，制定和提高该药材的质量标准，提高相应中成药产品质量和市场竞争能力，规范化种植该药材提供实验依据。1材料与仪器1.1材料苦玄参药材分别于200506～200601采收，每月采收1次，批号依次为200

3、506，200507，200508，200509，200510，200511，200512，200601。样品均采自广西中医学院药用植物园并经药学院刘寿养副教授鉴定为玄参科植物苦玄参Picriafel-tarraeLour的干燥全草；苦玄参苷ⅠA对照品由广西桂林植物研究所植化室梁小燕老师提供，经HPLC归一化法检测，含量达到98.0%以上。1.2试剂甲醇、乙腈（色谱纯），其他试剂均为分析纯。1.3仪器Agilent1100高效液相色谱仪，含在线真空脱气机(G-1322A)，高压四元梯度泵(G-1311A)，标准自动进

4、样器(G-1313A)，智能化柱温箱(G-1316A)，可变波长检测器(G-1314A)，二极管阵列检测器，Agilent1100series色谱工作站(美国安捷伦科技公司；CG-16illiporeSimplicity-185超纯水器（美国密里博公司）；BP211D电子分析天平（德国赛多利斯）。2方法2.1分析测定方法学研究2.1.1色谱条件色谱柱为C18ODS2柱(4.6mm×250mm，5μm，大连依利特公司)；检测波长264nm；流动相为乙腈-0.3％磷酸溶液（36∶64）；流速1ml/min；柱温30℃；进

5、样量10μl；理论塔板数以苦玄参苷IA峰计应不低于3000。2.1.2对照品溶液制备精密称取苦玄参苷ⅠA对照品适量（22.12mg），置10ml量瓶中，用适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为2.212mg/ml的对照品溶液。2.1.3供试品溶液制备取苦玄参药材干燥粗粉约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇25ml，称定重量，超声处理30min，放冷，用75%甲醇补足损失的重量，滤过，滤液备用。取上述滤液1.5ml置微型离心管中，以10000r/min速度离心10min，取上清液备用，即得

6、。2.1.4标准曲线制备分别精密吸取上述苦玄参苷ⅠA对照品溶液(2.212mg/ml)0.1，0.4，0.8，1.2，1.6和2.0ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。分别取上述稀释溶液各10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定色谱峰面积值。以峰面积为纵坐标，对照品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程为：Y=814.25X+1.25，r=0.9999。结果表明苦玄参苷IA进样量在0.221～4.424μg间呈良好线性关系。结果见表1。色谱图见图1。表1苦玄参苷IA线性关系考察结果（

7、略）2.1.5精密度实验取同一批供试品溶液（200509）10μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，测定苦玄参苷IA峰面积值，RSD=0.11%。结果见表2。表2精密度实验结果（略）2.1.6重复性实验取同一批（200509）苦玄参药材干燥粗粉约2g，精密称定，共取5份，按样品测定项下方法进行含量测定。结果RSD=1.3%。见表3。表3重复性实验结果（略）2.1.7稳定性实验取同一批供试品溶液（200509）在制备后0，2，4，8，12，24h分别进样10μl，测定苦玄参苷IA峰面积值，RSD=0.29%，表明供试品溶

8、液在24h内稳定。结果见表4。表4稳定性实验结果（略）2.1.8加样回收率实验取已测知苦玄参苷ⅠA含量的供试品（200509）干燥粗粉约1g，精密称定。分别精密加入一定量的苦玄参苷ⅠA对照品溶液（1.06mg/ml）2ml，按供试品溶液制备方法制备待测溶液，按上述色谱条件测定，计算加样回收率。结果见表5。2.2样品测定与结果2.2.1样品测定分