渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究论文

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1、渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究论文【摘要】目的探讨丹参饮片中采用渗漉法提取脂溶性部位的最佳工艺条件。方法以丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量为指标，采用L9(34)正交实验进行提取工艺全面优选，并用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定其含量。结果最佳乙醇渗漉工艺为：药材粉碎至绿豆粒大，用15倍量95%乙醇冷浸24h后，渗漉速度3ml/min。结论采用渗漉法提取丹参中脂溶性部位，操作简便，方法可行，降低了生产成本.freelethodoftheliposolubilityactiveprinciplesofRhizomaSalviaeMiltiorrhizae.Metho

2、dsTheextractionprocessinedbyRP-HPLCasindex．ResultsThebestextractionconditionofliposolubilitypartes95%alcohol,after24hourscold-soaking,percolateingl/min.ConclusionTheextractionmethodforRhizomaSalviaeMiltiorrhizaecansavetimeandenergyandbesuitableforthemodernproduction．Keyiltiorrhiza;Orthog

3、onaldesign;TanshinoneⅡA;Cryptotanshinone丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎。味苦，微寒，归心、肝经，具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦之功效，用于月经不调、经闭痛经、癥瘕积聚、胸腹刺痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等病症。丹参水溶性成分主要有丹参素以及丹参酚酸类，对这一部分的研究较多。丹参的脂溶性成分主要为丹参酮类化合物，主要成分有丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、二氢丹参酮等，具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用，还具有明显的抗肿瘤作用。1器材Aglient110

4、0系列液相色谱仪（美国惠普公司）；丹参酮、隐丹参酮对照品（中国药品生物制品检定所）；丹参饮片（南京本草药店），经自我鉴定为丹参SalviamiltiorrhizaBge.的根。2方法与结果2.1丹参提取脂溶性成分指标的建立2.1.1干膏率测定参照2005年版《中国药典》附录XA浸出物测定法，精密量取相当于丹参5g的药液，置于已干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移于干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，计算干膏收率，干膏收率（%）=干膏重量/丹参重量×100%。2.1.2丹参酮ⅡA、隐丹参酮的含量测定预试发现，由于丹参中丹酚酸类成分在波长268n

5、m处有着较强的紫外吸收，在进行提取工艺考察时，许多工艺在脂溶性成分被提出时，水溶性成分同时被提出，从而使UV法测定总丹参酮含量的方法在提取工艺考察过程中很不精确，故通过使用HPLC测定丹参酮ⅡA以及隐丹参酮的含量，对丹参脂溶性部位的提取工艺进行评价。色谱条件：色谱柱为ScienhomeKromasilC18(150mm×4.6mm)及预柱，流动相为甲醇-水(75∶25)，检测波长270nm，柱温30℃，流速0.8ml/min，理论板数以丹参酮ⅡA，隐丹参酮计均不低于2000。图谱见图1～2。图1隐丹参酮、丹参酮ⅡA的色谱图（略）图2样品色谱图（略）丹参酮ⅡA储备液的制备

6、：精密称取用五氧化二磷干燥5h的丹参酮ⅡA对照品4.82mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。隐丹参酮储备液的制备：精密称取用五氧化二磷干燥5h的隐丹参酮对照品4.83mg置25ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。混合标准品溶液的配制：精密量取2ml丹参酮ⅡA储备液和1ml隐丹参酮储备液置5ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，最终浓度为丹参酮ⅡA38.56μg/ml，隐丹参酮38.64μg/ml。标准曲线绘制：精密吸取上述混合标准品溶液2,.freell。从中精密量取2ml用甲醇定容至10ml容量瓶中，微孔滤膜过滤，进样10μl，按外标法

7、计算其中丹参酮ⅡA以及隐丹参酮含量。2.2脂溶性部位提取工艺研究渗漉是常用的浸出方法之一，渗漉时，溶剂渗入药材的细胞中溶解大量的可溶性物质之后，浓度增加，密度增大而向下移动，上层的浸取溶剂或稀浸液置换位置，造成良好的浓度差，使扩散较好地自然进行，故其浸出效果优于浸渍法，提取也较完全，而且省去了分离浸出液的时间和操作，故采用渗漉法来研究丹参中脂溶性部位的提取。在渗漉法提取脂溶性部位工艺研究过程中，拟对乙醇浓度、粉碎度、渗漉总的乙醇倍量以及渗漉流速的不同水平进行研究，以便寻找出最佳渗漉提取法。具体因素水平的设计详见表1。精确称量每份20g，先