渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究

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1、渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究【摘要】　　目的探讨丹参饮片中采用渗漉法提取脂溶性部位的最佳工艺条件。方法以丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量为指标，采用L9(34)正交实验进行提取工艺全面优选，并用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定其含量。结果最佳乙醇渗漉工艺为：药材粉碎至绿豆粒大，用15倍量95%乙醇冷浸24h后，渗漉速度3ml/min。结论采用渗漉法提取丹参中脂溶性部位，操作简便，方法可行，降低了生产成本，提高了药材利用率，使实验结果具有实际应用价值。【关键词】丹参；正交实验；丹参酮ⅡA；隐丹参酮　　Abstract：ObjectiveTostudythebestextra

2、ctionmethodoftheliposolubilityactiveprinciplesofRhizomaSalviaeMiltiorrhizae.MethodsTheextractionprocessinedbyRP-HPLCasindex．ResultsThebestextractionconditionofliposolubilitypartes95%alcohol,after24hourscold-soaking,percolatEingl/min.ConclusionTheextractionmethodforRhizomaSalviaeMiltiorrhizaec

3、ansavetimeandenergyandbesuitableforthemodernproduction．　　Keyiltiorrhiza;Orthogonaldesign;TanshinoneⅡA;Cryptotanshinone　　丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎。味苦，微寒，归心、肝经，具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦之功效，用于月经不调、经闭痛经、癥瘕积聚、胸腹刺痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等病症。　　丹参水溶性成分主要有丹参素以及丹参酚酸类，对这一部分的研究较多。丹参的脂溶性成分主要为丹参酮类化合物，主要成分

4、有丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、二氢丹参酮等，具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用，还具有明显的抗肿瘤作用。　　1器材　　Aglient1100系列液相色谱仪（美国惠普公司）；丹参酮、隐丹参酮对照品（中国药品生物制品检定所）；丹参饮片（南京本草药店），经自我鉴定为丹参SalviamiltiorrhizaBge.的根。　　2方法与结果　　2.1丹参提取脂溶性成分指标的建立　　2.1.1干膏率测定参照2005年版《中国药典》附录XA浸出物测定法，精密量取相当于丹参5g的药液，置于已干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移于干燥器中冷却30min，

5、迅速精密称定重量，计算干膏收率，干膏收率（%）=干膏重量/丹参重量×100%。　　2.1.2丹参酮ⅡA、隐丹参酮的含量测定预试发现，由于丹参中丹酚酸类成分在波长268nm处有着较强的紫外吸收，在进行提取工艺考察时，许多工艺在脂溶性成分被提出时，水溶性成分同时被提出，从而使UV法测定总丹参酮含量的方法在提取工艺考察过程中很不精确，故通过使用HPLC测定丹参酮ⅡA以及隐丹参酮的含量，对丹参脂溶性部位的提取工艺进行评价。　　色谱条件：色谱柱为ScienhomeKromasilC18(150mm×4.6mm)及预柱，流动相为甲醇-水(75∶25)，检测波长270nm，柱温30℃，流速0.

6、8ml/min，理论板数以丹参酮ⅡA，隐丹参酮计均不低于2000。图谱见图1～2。　　图1隐丹参酮、丹参酮ⅡA的色谱图（略）　　图2样品色谱图（略）　　丹参酮ⅡA储备液的制备：精密称取用五氧化二磷干燥5h的丹参酮ⅡA对照品4.82mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。　　隐丹参酮储备液的制备：精密称取用五氧化二磷干燥5h的隐丹参酮对照品4.83mg置25ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。　　混合标准品溶液的配制：精密量取2ml丹参酮ⅡA储备液和1ml隐丹参酮储备液置5ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，最终浓度为丹参酮ⅡA38.56μg/ml，隐

7、丹参酮38.64μg/ml。　　标准曲线绘制：精密吸取上述混合标准品溶液2,6,10,15，20μl依次进样，在上述色谱条件下测定，记录色谱图、峰面积值，并以峰面积Y对进样量X(μg)回归，结果可见：丹参酮ⅡA标准曲线Y=7083.3X-17.59(R=0.9999)，线性范围为0.07712～0.7712μg。　　隐丹参酮标准曲线Y=6356.5X-11.28(R=1)，线性范围为0.07728～0.7728μg。　　精密度实验：取混合标准品溶液，分别进样10μl5次，测得峰面