诱骗受体3对大鼠移植肝脏的保护作用

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1、诱骗受体3对大鼠移植肝脏的保护作用王槐志黎万玲张玉君陈志宇朱瑾郑平熊燕董家鸿【摘要】目的将重组诱骗受体3(decoyreceptor3,DcR3)腺相关病毒(adeno?associatedvirus,AAV)感染移植肝，探讨DcR3对移植肝的保护作用。方法实验动物分为同基因肝移植组(G1)、同种异体肝移植组(G2)、AAV空病毒感染的同种异体肝移植组(G3)、重组DcR3/AAV感染的同种异体肝移植组(G4)。常规建立同种异体大鼠肝移植模型；术中取预先制备的浓缩1×109IU病毒颗粒感染移植肝；术后观察大鼠的存活时间、肝功能，荧光显

2、微镜及光镜下观察DcR3在肝脏中的表达及肝脏病理改变。结果G4组的平均生存时间比G2、G3组显著延长，G2、G3组的平均生存时间差异无统计学意义。G4组大鼠术后15、20d的肝功能、肝脏病理改变分别与G2、G3组大鼠术后7、10d相似。结论DcR3对大鼠移植肝有显著的保护作用。【关键词】诱骗受体3；肝移植；保护作用；大鼠　　Protectiveeffectsofdecoyreceptor3onratliverallograft【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectofde

3、coyreceptor3(DcR3)onratliverallograftbyinfectingliverallograftanDcR3/adeno?associatedvirus(AAV).MethodsAllratsodelethods.Liverallograftseofratesandliverfunctionicroscopeandlightmicroscope.ResultsThemeansurvivaltimeofratsinG4ilartothoseatpostoperativedays7and10ofG2andG3.

4、ConclusionsDcR3hasprotectiveeffectonratliverallograftafterlivertransplantation.【Keyl备用［5］。AAV病毒中自带的绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)可作为DcR3表达的标志。　　1.2实验动物近交系DA大鼠，质量180～200g，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供；近交系Lel后经门静脉注入肝脏，同时夹闭下腔静脉两端及门静脉保存30min，至供肝植入时放开。重组DcR3/AAV感染的同种异体肝移植组(G4，n=10)：

5、所用病毒颗粒为重组DcR3/AAV病毒颗粒，余同G3组。　　1.4动物模型的建立采用经典的二袖套法建立大鼠原位肝移植模型。　　1.5标本采集于肝移植术后1、3、5、7、10、15、20d从大鼠尾静脉取2ml抗凝血。于肝移植术后7、10、15、20d麻醉状态下开腹取小块肝脏标本，然后关腹让动物继续生存。　　1.6观测指标观察大鼠术后一般情况、存活时间至术后25d。术后存活时间超过24h视为手术成功。采用Beckman全自动生化分析仪检测肝功能。取不同时相点的肝组织行冰冻切片及常规石蜡切片，同时常规进行苏木精?伊红染色，在荧光显微镜及光镜

6、下观察DcR3的表达及肝脏病理改变。　　1.7统计学分析结果以±s表示，各组间均数比较采用方差分析。生存时间采用SPSS11.5软件绘制成Kaplan?Meier曲线，比较采用对数秩检验(Log?rank)。P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1一般情况手术后5min左右，大鼠即清醒、站立，30min后能饮水。第2天各组大鼠的精神、食欲稍差，活动较少。第3天各组大鼠的活动、饮食及精神状况恢复正常。G2、G3组大鼠第7天开始出现皮肤、巩膜黄染，尿液发黄，毛杂乱，精神、食欲差，活动减少。G4组大鼠则于第15天开始出现上

7、述表现。G1组大鼠未见异常表现。(责任编辑：)　　2.2生存曲线G1组长期存活，与G2、G3、G4组比较差异有统计学意义(χ2=17.17、17.49、17.69，P<0.05)；G2组平均生存时间(10.9±0.5)d；G3组(11.0±0.6)d；G4组(20.5±0.5)d。G4组比G2、G3组显著延长(χ2=20.67、21.06，P<0.05)，G2、G3组比较差异无统计学意义(χ2=0.13，P=0.7136)(图1)。　　2.3肝功能的改变　　2.3.1术后ALT的变化：各组大鼠肝移植术后第1天ALT显著升高

8、，至第5天左右降至正常。G1组ALT一直维持正常至观察结束。G2、G3组ALT自术后第7天开始显著升高直到受体大鼠死亡。G4组大鼠ALT维持正常，自术后第15天开始显著升高直到受体大鼠死亡。　　2.3.2术后TB的变化：