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《sirna表达载体抑制宫颈癌siha细胞增殖的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、siRNA表达载体抑制宫颈癌SiHa细胞增殖的实验研究四川大学'医S学ciE版d2007;38(4)JSichuanUniv(MedScEd:587—589i)…'.siRNA表达载体抑制宫颈癌SiHa细胞增殖的实验研究王丹青,彭芝兰△,尹如铁,牛晓宇,李大可,官立丽四川大学华西第二医院妇产科(成都610041)【摘要】目的观察HPV16E7siRNA表达载体对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响.方法利用脂质体将HPV16E7特异性siRNA表达载体转染SiHa细胞,通过荧光定量RT—PCR检测E7mRNA的变化;流式细胞仪检测E7蛋白的
2、变化和细胞周期的分布;MTT法检测细胞增殖的变化.结果HPV16E7siRNA表达载体可明显抑制SiHa细胞E7mRNA和E7蛋白的表达,抑制率分别为92.15%,84.3O;阻滞SiHa细胞由G期进人S期;抑制细胞的生长.结论HPV16E7siRNA表达载体可以特异高效地抑制宫颈癌SiHa细胞E7基因的表达,从而调控肿瘤细胞周期,抑制肿瘤细胞增殖.【关键词】HPV16E7siRNA表达载体宫颈癌细胞增殖【中图分类号】R737.33ExperimentalStudyonInhibitionofCervicalCarcinomaSiH
3、aCellProliferationbysiRNAExpressionVectorWANGDan—qing,PENGZhi—lan,YINRu—tie,N1UXiao—yu,L1Da—ke.GuanL—li.DepartmentofObstetricsandGynecology,PstChinaSecondHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041,China[Abstract]ObjectiveT0observetheeffectofHPV16E7specificexpressionvecto
4、roncellproliferationincervicalcarcinomaSiHacells.MethodsTheHPV16E7siRNAexpressionvectorandemptyexpressionvectorweretransfectedintoSiHa~:ellsbyliposome.TheeffectsonE7mRNAandE7proteinexpression,cellcyclephaseandeellgrowthratewereexaminedrespectivelybyreal—timeRT—PCR.FCMa
5、ndMTTassay.ResultsTheHPV16E7siRNAexpressionvectorsignificantlyinhibitedtheexpressionlevelsofE7mRNAandE7protein,theinhibitionratesbeing92.15and84.30respectively.ItalsoinhibitedthetransitionfromGlphasetoSphaseandthegrowthofSiHacellline.ConclusionHPV16E7specificsiRNAexpre
6、ssionvectorcouldspecificallyandefficientlyinhibittheexpressionofE7geneandhenceitcouldregulatecellcycleandinhibitcellproliferationincervicalcarcinomaSiHacells.[Keywords]HPV16E7siRNAexpressionvectorCervicalcancerCellproliferation研究表明,人乳头瘤病毒(HPV)16型E7基因在官颈癌的发生发展及恶性表型的维持中起
7、着至关重要的作用,因此它已成为宫颈癌基因治疗的理想靶点之一.RNA干扰(RNAi)技术是新近发展起来的一种封闭基因表达的有效方法L1].已有研究证实化学合成的小干扰RNA(siRNA)能有效地抑制目的基因的表达,但作用持续时间短[2],而siRNA表达载体的方法可能延长作用持续时间.本研究拟通过载体介导的RNAi技术来封闭宫颈癌SiHa细胞E7基因的表达,观察HPV16E7siRNA表达载体对SiHa细胞增殖的影响.1材料和方法1.1细胞转染SiHa细胞为HPV16阳性的宫颈癌细胞株(购自武汉大学典型物培养保藏中心).在前期研究中,
8、用脂质体法将HPV16E7特异性siRNA表达载体(由本室设计构建保存Ⅲ)和空载体转染SiHa细胞,*国家自然科学基金(批准号30371483)资助△Correspondingauthor,E—mail:pengzled@yahoo.
