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1、乙肝病毒血清标记物与血清HBVDNA的关系【摘要】目的:探讨不同乙肝感染模式的患者与HBVDNA定量结果进行对比分析。方法:采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物,荧光定量PCR(FQPCR)检测HBVDNA,比较二者之间的关系。结果:HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组和HBsAg、HBeAg阳性组HBVDNA检出率较高,分别为96.61%和100%。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBVDNA含量平均水平为3.86×108,HBsAg、HBeAg阳性组HBVDNA含量平均水平为1.73×108;HBsAg、HBeAb、HB
2、cAb阳性组和HBsAg、HBcAb阳性组检出率也较高,达45%以上,HBVDNA含量平均水平分别为1.30×107和1.31×106。结论:FQPCR检测HBVDNA能准确地反映体内的HBV真实感染和复制情况,在乙肝的诊断和治疗中,不能单凭两对半的检测,同时应做HBVDNA的定量测定。【关键词】HBVDNAELISAFQPCR 乙型肝炎病毒是一种严重危害人类健康的传染病,它是由乙肝病毒（HBV）感染引起的,我国是乙肝携带者高于人群的10%。急性乙肝中有20%会转为慢性乙肝,进而可能发展为肝硬化和肝癌,因此,准确、迅速的诊断对乙肝的治疗和预后
3、极为重要。FQPCR技术融合了PCR技术和DNA探针杂交技术的优点,直接探测PCR过程中荧光信号的变化,而且整个实验过程在完全封闭的状态下进行,5不需要PCR的后处理和电泳检测,具有快速、准确、特异等优点。我们对本院321例不同乙肝感染模式的患者与HBVDNA定量结果进行了实验对比分析。 1材料和方法 1．1材料321份血清标本均来自2006-01/2007-07我院门诊及住院患者。荧光定量PCR系统购自博日公司;HBVDNA诊断试剂盒购自深圳匹基公司;HBV血清标志物ELISA诊断试剂盒购自英科新创公司。 1．2方法血清标本的采集,采用灭菌
4、的一次性带盖塑料管,清晨空腹抽取静脉血5mL,离心分离血清,-20℃保存,不超过7d进行FQPCR。 1．3实验分组用ELISA法分别对321例血清进行HBV两对半检测（血清标记物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,分别编号为1、2、3、4、5;(+)为阳性,(-)为阴性）,并依据检测结果进行分组。分组如下:A:1(+)、3(+)、5(+);B:1(+)、4(+)、5(+);C:1(+)、3(+);D:1(+)、5(+);E:2(+)、4(+)、5(+);F:2(+)、5(+);G:4(+)、5(+);H:4(+);I:5(+
5、);J:全(-)。5 2结果 2．1荧光定量结果判断标准HBVDNA定量以1×103拷贝/L为判断阳性的标准,<1×103拷贝/L为阴性,>1×103拷贝/L判为阳性。 2．2定量结果比较HBV感染血清标志物各组合模式与HBVDNA定量结果的比较（表1）。 表1321例ELISA检测结果与HBVDNA定量结果的比较（略） 3讨论 HBV血清学标志物检测是乙型肝炎病原学诊断的指标,包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb五项指标。HBsAg阳性表示存在HBV感染,见于急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者。HB
6、eAg是HBV复制的指标之一。HBsAb阳性表明曾经感染过HBV或注射乙肝疫苗后产生保护性抗体,对再次感染具有抵抗力。 通过表1观察发现HBVDNA在HBV血清学标志物阳性的各种模式中的检出率不一样,A组（1、3、5阳性）和C组（1、3阳性）HBVDNA检出率较高,分别为96.61%和100%。A组HBVDNA含量平均水平为3.86×1011,C组HBVDNA含量平均水平为1.73×1011,5说明这两组患者具有强烈的传染性。B组（1、4、5阳性）和D组（1、5阳性）检出率也较高,达45%以上,B组HBVDNA含量平均水平为1.30×1010
7、,D组HBVDNA含量平均水平为1.31×109,说明有半数乙肝患者具有强烈的传染性,应避免传播途径。E组（2、4、5阳性）和F组（2、5阳性）HBVDNA检出率分别为4.76%和13.04%,说明患者虽然有抗体,但仍有小部分患者存在HBVDNA复制,可能原因为ELISA测定的敏感性低,使低浓度的HBsAg漏检或者患者免疫功能低下,不产生免疫应答或患者出现免疫耐受现象,ELISA无法测定出相应的抗原、抗体。J组（全阴性）HBVDNA检出率为20%,HBVDNA含量为2.35×107,原因可能为病毒感染早期,抗原、抗体尚未形成。或者ELISA测定的
8、敏感性低,使低浓度的HBsAg漏检。另外,出现HBsAg、HBeAg阳性而HBV
