香菇多糖的抗肿瘤活性研究

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数理医药学杂志2009年第22卷第3期文章编号：1004—4337(2009)03—0337-02中图分类号：R979．1文献标识码：A·药学研究·香菇多糖的抗肿瘤活性研究尹向前(武汉钢铁集团公司第二职工医院肿瘤科武汉430085)摘要：目的：研究香菇多糖(EGb)的体内、体外抗肿瘤活性。方法：选取人乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞HepG2、胃癌细胞SW480，不同浓度的香菇多糖分别处理3种肿瘤细胞，MTT法分别检测香菇多糖的体外抗肿瘤活性；选取荷MCF-7肿瘤裸鼠，给予香菇多糖，通过肿瘤生长抑制率，考察香菇多糖的体内抗肿瘤活性。结果：香菇多糖对3种肿瘤细胞均有细胞毒性，呈剂量依赖性，ICso分别为6．855、10．083、8．563p_M；香菇多糖可显著降低肿瘤重量，提高肿瘤生长抑制率。结论：香菇多糖体内外实验均显示良好抗肿瘤活性。关键词：香菇多糖；肿瘤；体内；体外香菇多糖最早由日本科学家研制，从香菇的实体中提取、阿霉素。将对数生长期的细胞接种于96孔板种，接种密度为分离、纯化的一组多糖成份，具有生物反应调节机制。目前研5×10，待长至对数生长期后分别加入不同浓度的香菇多糖究发现香菇多糖(1entinan，LNT)具有增强机体免疫、治疗慢(100，10，1，0．1，0．01>M)，空白对照组只加培养液，对照组为性病毒性肝炎和抗肿瘤等药理活性。肿瘤一直是威胁人类健阿霉素(100，10，1，0．1，0．OI~M)。孵育48h后每孔加入2O止康的重要原因，人们对于抗肿瘤药物的筛选从未停止。为进MTT，4h后吸去药物，每孔加入150gL的DMSO溶解，并在一步研究香菇多糖的抗肿瘤活性，以期寻找一种新的具有抗酶标仪下于570rim处检测细胞活性。公式计算细胞生长抑制肿瘤活性的低毒性天然药物，本研究选取3种肿瘤细胞，并建率，细胞存活率对剂量对数线性回归计算It&。值。其中香菇立荷瘤裸鼠模型，考察香菇多糖的体内外抗肿瘤活性，揭示其多糖先溶于DMSO，再用培养液稀释至所需浓度，其中DMSO临床肿瘤治疗的可能应用前景。含量不超过0．1。细胞生长抑制率一(1一实验孔吸光值／空白对照孔吸光1材料与方法值)×1001．1动物1．4．3荷瘤裸鼠模型的建立及药物对裸鼠乳腺癌的治疗作裸鼠BALWc-nu，雌性，体重18~22g，购自第四军医大学用将MCF-7人乳腺癌细胞株接种于裸鼠右侧胸壁乳垫下，实验动物中心，动物合格证号：陕动准字第O1号，军动准字第复制裸鼠乳腺癌动物模型[2]。动物模型复制成功后，将其分C98001清洁级。成5组，每组1O只。空白对照组每只给予生理盐水0．3ml／d；1．2药品及试剂阳性对照组阿霉素剂量为10mg／kg，每只给药0．3ml／d，连续香菇多糖购于南京康海药业有限公司；阿霉素由浙江海l0天给药；香菇多糖3个剂量组为10．5mg／kg、21mg／kg、正药业提供；MTT(噻唑蓝)购于Sigma公司；人乳腺癌细胞42mg／kg，口服灌胃给药每只0．3ml／d，连续给药lO天。给药MCF-7、肝癌细胞HepG2、胃癌细胞SW48O均来源于美国后第ll天称体重脱臼处死裸鼠，取出肿瘤称重，计算抑瘤率，ATCC细胞库；DMEM高糖培养基购于Invitrogen公司；其余统计体重变化情况。试剂均为分析纯。抑瘤率一(1一实验组平均瘤重／对照组平均瘤重)×1．3主要仪器100ThermoMultiskanMk3酶标仪(芬兰雷勃公司)；光学显1．5统计学处理微镜(13本OLYMPUS公司)。所有数据均用结果均用五S表示，统计分析用组间t检1．4方法验。1．4．1细胞培养MCF-7、HepG2、SW480细胞均选择2结果DMEM高糖培养基，含10％胎牛血清，37℃下5,o4C02培养。倒置显微镜下观察细胞生长情况。2．1体外细胞毒性实验1．4．2体外细胞毒性实验MTT法[检测香菇多糖对香菇多糖各剂量组与空白对照组比较均能显著抑制3种MCF-7、HepG2、SW480细胞的体外细胞毒性，阳性对照药为肿瘤细胞生长，P<0．05或P<0．001，呈剂量依赖性，与阿霉收稿日期：2009-02—15 JournalofMathematicalMedicineVo1．22No．32009素相比无统计学意义，效果相当。见图1～3。IC。值见表1。各剂量香菇∞多∞糖∞对M∞CF如-7∞荷如瘤如裸鼠均O有抑瘤效果，大∞剂∞如∞量组效果最佳，抑癌率为63．O3，与空白对照组比较有显著表1香菇多糖对不同肿瘤细胞系的的IC。(n=3)性差异(P