马铃薯脱毒种薯技术医学

《马铃薯脱毒种薯技术医学》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、马铃薯脱毒种薯生产技术“脱毒种薯”“种薯”是指那些作为种子用的薯块。“脱毒种薯”是指种薯经过一系列物理、化学、生物或其它技术措施清除薯块体内的病毒后，获得的经检测无病毒或极少有病毒侵染的种薯。为什么马铃薯种薯需要脱毒:退化:在马铃薯栽培过程中，植株的逐年变小，叶片皱缩卷曲，叶色浓淡不均，茎秆矮小细弱，块茎变形龟裂，产量逐年下降等现象，这种现象叫“退化”。种薯“退化”是引起产量降低和商品性状变差的主要原因。“退化”主要原因:病毒的侵染及其在薯块内积累。马铃薯种薯脱毒和种薯生产程序目前我国马铃薯种薯产业存在的

2、主要问题:我国马铃薯脱毒快繁和种薯繁殖技术，具有世界先进水平，但目前我国的种薯质量不容乐观。脱毒种薯繁育体系不完善，无权威的种薯质量监控机构，种薯生产未形成规模化、产业化，种薯市场混乱，生产不规范，无国家统一的种薯质量和病虫害检测标准，严重影响马铃薯的产量和种植者的利益。植物茎尖脱毒技术能够脱去哪些病毒?经高温处理后，进行茎尖分生组织培养可以脱除PLRV、PVY、PVX、PVA、PVS、PVM(马铃薯M病毒)及PAMV(马铃薯杂斑病毒或马铃薯奥古巴花叶病毒)。马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTV)是一种非常顽固

3、的病害，目前利用茎尖脱毒的方法是很难根除的。PSTV既可以通过田间植株传毒，又能通过种子带毒，新育品种的亲本如带有PSTV，其后代很难避免被PSTV侵染，因此在种薯生产和新品种选育中要绝对杜绝PSTV的存在。马铃薯S病毒(PVS)也是比较难脱掉的病毒，PVS单独存在时对产量的影响较小，但在复合侵染时也可以造成严重减产。现在PVS在我国已有蔓延趋势，要生产高质量的种薯必须根除PVS和其它病毒，一般茎尖苗只要脱掉PVS，其它容易脱掉的病毒也随之脱除。（潜隐花叶病(PVS)）脱毒材料休眠打破及表面消毒:入选块茎

4、用1％硫脲+5毫克／升赤霉素浸种5分钟，以打破休眠。用湿润砂覆埋，置于25℃黑暗条件下催芽。待薯块顶芽生长至2厘米时，取芽作为外植体用于茎尖脱毒。消毒方法是先用刀片切取2—3厘米的壮芽，将芽在75％的酒精中过一遍(几秒钟)，然后用饱和漂白粉上清液或用市售的次氯酸钠溶液稀释为5％—7％，浸泡15—20分钟，然后用无菌水清洗3-4次。一次消毒的芽不能太多，以免消毒后材料放置时间太长，茎尖发生褐变，对植物组织产生较大的伤害，影响成活率。脱毒材料的热处理:为提高脱毒效果，应进行材料的热处理，1.钝化病毒活性，2.

5、消除马铃薯卷叶病毒，3.提高脱毒效果。用手术刀，切取1—1.5毫米左右的茎尖。取下的茎尖接种在不含任何激素的快繁基上培养，于25℃每天光照16小时的培养室培养。待茎尖长至1厘米时转入光照培养箱培养，以每天16小时光照，36℃的高温处理6-8周。马铃薯茎尖分生组织剥取取经高温处理后的试管苗的茎尖，在30-40倍解剖镜下进行茎尖分生组织剥离。用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织，暴露出顶端圆滑的生长点，用解剖针细心切取所需的茎尖分生组织。一般切取茎尖的长度为0.1-0.3毫米，带有1—2个叶原基。马铃薯茎尖分

6、生组织示意图切取的茎尖分生组织随即接种到茎尖培养基上，以切面接触琼脂，置于培养室进行离体培养。茎尖分生组织培养的容器以15厘米×2厘米的试管为宜，每管盛10毫升培养基接种一个茎尖，同时给试管壁编号并作工作日记，注明接种的品种、试管数、日期等。茎尖培养注意点:茎尖分生组织培养的适宜温度为22—25℃，光照强度2000—4000Lux，光照时间为每天16小时。注意:植物激素以及有机成分的搭配使用，在对培养基进行激素搭配时应以不使茎尖愈伤化为基本原则，使茎尖直接发育生长成植株，而不能经愈伤组织再分化发育成植株，

7、因为经愈伤组织分化的植株很容易使植株分生变异。适宜马铃薯茎尖分生组织培养的培养基：以MS+赤霉素0.1毫克/升+6-苄基腺嘌呤0.1毫克/升+D-泛酸钙0.2毫克/升+蔗糖2％，琼脂0.6％，pH5.8，为比较好的培养基组合。经过茎尖脱毒的材料进行病毒检测目的：第一次扩繁后要对试管苗进行病毒检测。剥取茎尖的大小直接关系到脱毒效果，一般剥取的茎尖愈小成苗率愈低，但脱毒率高，而培养的茎尖愈大，成苗率愈高，但脱毒率低。因此只有经病毒检测后，确认是不带病毒的株系，才能进一步利用，对继续带病毒的株系应淘汰或进行再次

8、脱毒。常见的病毒检测技术常用的马铃薯病毒检测技术指示植物检测血清学技术检测(ELISA)免疫吸附电子显微镜检测现代分子生物学技术检测。常用的类病毒检测技术聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、往返凝胶电泳(RGE)cDNA探针脱毒后的材料需要进行田间试种1.经病毒检测后确认不带有病毒的试管苗在进一步大量扩繁或工厂化生产前，还需要进行田间试种观察鉴定，将每个无病毒株系的试管苗取出一部分，移栽或诱导成试管薯播种到大田试种、观察，检验其是