五种杀菌剂对蓖麻葡萄座腔菌的室内毒力测定

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1、五种杀菌剂对蓖麻葡萄座腔菌的室内毒力测定姜晓龙１，２，金磊磊２，喻镇东２，陈辉辉２，邵荣１，许伟１，陈集双２（１．盐城工学院化学与生物工程学院，江苏盐城２２４０００；２．南京工业大学生物与制药工程学院，南京２１００００）摘要：通过对蓖麻（Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ）发病部位进行真菌分离、纯化、鉴定、致病性测定，确定侵染蓖麻的病原菌为葡萄座腔菌（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｄｏｔｈｉｄｅａ），并采用菌丝生长速率法测定５０％多菌灵ＷＰ、７０％甲基托布津ＷＰ、７５％百菌清ＷＰ、９９％恶霉灵ＷＰ、８０％代森锰锌ＷＰ５种杀菌剂对菌丝生长的毒力。结果表明，毒力最强的杀菌剂是５０％多菌灵，

2、对病菌Ｂ．ｄｏｔｈｉｄｅａ的ＥＣ５０为０．１７３５μｇ／ｍＬ，抑菌效果明显优于其他４种杀菌剂。..关键词：蓖麻（Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ）；葡萄座腔菌（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｄｏｔｈｉｄｅａ）；杀菌剂；毒力测定中图分类号：Ｓ４８２．２文献标识码：A：0439－８114（２０15）16－3942-03DOI:10.14088/j.ki.issn0439-8114.2015.16.028收稿日期：２０１５－０５－２８简介：姜晓龙（１９８９－），男，江苏常州人，在读硕士研究生，研究方向为植物病毒和真菌病毒，（）１８５１６０９９５６０（电子信箱）ｊｉａｎｇ７７３５０７１６６＠

3、１２６．ｃｏｍ；通信，许伟（１９７６－），女，副教授，博士，主要从事生物资源开发及酶工程研究，（电子信箱）ｙｃｉｔｘｕｗｅｉ＠ｙｃｉｔ．ｅｄｕ．ｃｎ。蓖麻（Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ）属于大戟科（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ）蓖麻属，一年生或多年生草本植物，俗称草麻、大麻子、红麻等，是世界十大油料作物之一［１］。原产于东非埃塞俄比亚，先后传入亚洲、欧洲和美洲，以印度、中国、巴西最多［２］。蓖麻植株高大，茎干粗壮，根系强大，入土深，耐旱性强。蓖麻适应性广，具有耐瘠薄、耐盐碱能力，可在丘陵、山坡、盐碱等地种植［３］。蓖麻具有很高的经济价值，蓖麻叶宽大，营养丰富，可养蚕；秸秆可以造纸

4、；油渣饼脱毒后可作饲料，还可以作为生物防虫剂；最重要的是蓖麻子，经加工后可产蓖麻油，蓖麻油是重要的工业原料［４－６］。葡萄座腔菌（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｄｏｔｈｉｄｅａ）是一种常见的植物病原菌，为害很多经济树种和植物，常见的有梨、桃、栗子、桉树等［７］。杀菌剂已广泛用于防治葡萄座腔菌等真菌，市场上普遍使用较多的是甲基托布津、多菌灵和百菌清等。为了能够有效地控制葡萄座腔菌在蓖麻上产生的危害，本研究使用市面上常用的５种杀菌剂对上述病原菌进行室内毒力测定，以期为葡萄座腔菌的大田防治奠定基础。１材料与方法１．１试验材料供试菌株为葡萄座腔菌，２０１３年从苏东发病蓖麻上分离得到并通过纯

5、化和鉴定，保存于４℃冰箱中。供试药剂为多菌灵（江苏蓝丰生物化工股份有限公司，５０％可湿性粉剂），甲基托布津（江苏龙灯化学有限公司，７０％可湿性粉剂），百菌清（陕西亿农高科药业有限公司，７５％可湿性粉剂），恶霉灵（山东省烟台鑫润精细化工有限公司，９９％可湿性粉剂），代森锰锌（山东曹达化工有限公司，８０％可湿性粉剂）。１．２试验方法１．２．１真菌的生物学特性温度对菌丝生长的影响：将保存的真菌转接到ＰＤＡ培养基上，培养５ｄ后，用直径５ｍｍ的灭菌玻璃管取菌饼，接到新鲜的ＰＤＡ培养基上，每个培养基上放置一个菌饼，分别在５、１０、１５、２５、２８、３０、３２、３５、４０℃的恒温环境下培养，每

6、个温度设置３个重复，５ｄ后测量菌落的直径［８］。ｐＨ对菌丝生长的影响：以去离子水（ｐＨ７．０）配制的ＰＤＡ培养基为对照，配制不同ｐＨ的ＰＤＡ培养基，ｐＨ依次为１．０、３．０、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、９．０、１０．０。同样用直径为５ｍｍ的玻璃管接种，每个ｐＨ设置３个重复。接种后的培养基在２８℃恒温培养箱中培养，５ｄ后测量菌落直径［８］。１．２．２杀菌剂对菌丝生长的影响采用生长速率法测定［９］。５种药剂按倍稀释法进行稀释，用无菌水分别制成浓度为１０００μｇ／ｍＬ的母液，加入到ＰＤＡ液体培养基中，使培养基浓度分别为０．０１、０．１、１、１０、５０μｇ／ｍＬ，然后

7、制成含药品的培养基平板，并加入少许链霉素，抑制细菌生长。用直径为５ｍｍ的玻璃管取已在ＰＤＡ上活化５ｄ的菌饼，置于培养皿中央，每个浓度设置３个重复。２８℃恒温培养箱中培养７２ｈ后取出，用十字交叉法测量各培养皿中菌落的直径，取其平均值去掉菌饼的原来大小为最终菌落直径。根据不同浓度下的菌落直径、空白对照（不加药剂）的菌落直径和不同药剂浓度下菌落生长直径计算抑菌率。以药剂浓度（μｇ／ｍＬ）的对数值为自变量，抑菌率的大小为因变量，计算出药剂抑制浓度（ＥＣ５０），根据ＥＣ５０评价药效。Ｄ（菌