epha2在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关研究

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1、EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关研宄钟启宝1冯晓辉2罗欣荣1李云秋2易恩欢1(1讼沙市第三医院耳鼻咽喉-头颈外科410017；2湖南省人民医院耳鼻咽喉-头颈外科410005)【中图分类号】R730.5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)7-0229-02【摘要】目的探讨EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达和其与喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系。方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法(SP法)检测90例喉鳞状细胞癌和80例正常鳞状上皮中EphA2的表达情况。结果EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达明显高于正常鳞状上皮(p<0.01),EphA2的表达与喉

2、鱗状细胞癌的组织分化程度、颈淋巴结转移和TMN分期宥关(p<0.05),而与喉鳞状细胞癌患者的年龄和性别无关(P>；0.05)o结论EphA2可能在喉鱗状细胞癌的发生发展中起一定的促进作用，EphA2的高表达可能提示了喉鳞状细胞癌的恶性程度。【关键词】EphA2喉鳞状细胞癌免疫组化Eph家族成员参与了许多组织和器官的形成，神经系统信号传递、血管形成、细胞与细胞之间的粘附状态的调节及肿瘤的发生、发展以及转移。EphA2为Eph家族的重要成员，在人体内分布广泛，定位于染色体lp36.1。研宄发现EphA2参与多种牛.理过程,在多种肿瘤中呈高表达且可能参与肿瘤的形成、促进肿瘤向恶

3、性型发展，包括肿瘤的侵袭性和转移性等，并且可能提示肿瘤的恶性程度及预后，目前在国内外，EphA2在喉癌中的报道较少。木研宄探讨EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达和其与喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系。1临床资料1.1一般资料收集湖南省人民医院2004〜2010年病理科保存、外科手术切除的喉鱗状细胞癌石蜡包埋标木90例，分别记录患者的年龄、性别、组织分化程度、有无颈淋巴结转移以及TMN分期[按国际抗癌协会（UICC）TNM分类标准（2002）[1]制定临床分期]。所奋喉鱗癌患者均经手术切除并经临床常规病理证实，不合并其它恶性肿瘤，术前亦未进行任何抗肿瘤治疗（包括化疗、放疗、免疫治疗等）。9

4、0例标本中男性患者82例，女性患者8例，艽中年龄≤60岁39例，年龄〉60岁51例；按组织学分级：高分化，中分化、低分化分别为42例、29例、19例；有颈淋巴结转移转移52例，无颈淋巴结转移38例；按TNM分期分别为I期13例、II期20例、III期42例、IV期15例。正常鱗状上皮80例，取自喉良性病变周边的粘膜，经HE染色确诊。1.2主要试剂及实验方法EphA2（BA0833）兔抗人多克隆抗体，购于武汉博士德生物工程有限公司，链素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）试剂盒均购自福州迈新生物技术开发奋限公司。所有的常规石蜡包埋标本，制成层厚为4μm的连续切片。参照试剂盒说明

5、进行操作（注EphA2抗体的工作浓度为1:150）。用PBS代替一抗做阴性对照；已知阳性表达组织做阳性对照。1.3判定标准以细胞浆或细胞膜中出现棕黄色颗染色强度高于背景非特异性染色者为阳性为阳性：阳性细胞数目≤25%为阴性；26-50%为弱阳性；＞50%为强阳性。按把弱阳性和强阳性表达合称为阳性表达。1.4统计学方法采用SPSS17.0统计学软件，计数资料用率（％）表示；阳性率的比较，用x2检验。2结果2.1EphA2蛋白在喉鱗状细胞癌和正常鱗状上皮中的表达EphA2表达可见于细胞膜、细胞浆，阳性细胞棕黄色颗粒分布于个癌细胞浆或沿细胞膜呈线状分布。在喉鳞状细胞癌中，EphA2表

6、达大多为强阳性，位于细胞浆区域，部分癌细胞胞浆可成棕黄色或棕褐色（见图1），部分血管内皮细胞也可见阳性表达（见图3）。在正常鱗状上皮中，EphA2表达主要为阴性和弱阳性，阳性多位于细胞膜区域，部分胞浆成浅黄色(见图2);喉鱗状细胞癌和正常鱗状上皮EphA2表达的阳性率分别为75.56%(68/90)、33.75%(27/80),两组间表达阳性率比较，差异有显著性(p<0.01)o2.1EphA2表达与喉鱗状细胞癌临床病理特征的关系(见表1)表1EphA2的表达与喉鱗状细胞癌临床病理特征的关系3讨论近来研究表明EphA2可以通过信号转导参与胚胎发育，特别是神经系统及血管系统的发生

7、和发育［2】/凋节细胞增殖、分化，维持细胞之间的黏附，促进血管的增生和调节血管的存活。在多种恶性肿瘤中EphA2由于信号转导的异常，不能正常磷酸化，积聚，表达显著上调。而EphA2高表达时同样可以通过信号转导导致肿瘤的发生、肿瘤血管的生成［3］、肿瘤的侵袭、浸润、转移。并且高表达者恶性度高、进展快、易转移及预后差。并被认为可能是反映恶性肿瘤进展、生物学行为及预后的重标志物之一。通过调节EphA2的表达可以抑制肿瘤的侵袭、浸润、转移［4-6］。0前有关Eph