aqp1和vegf在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达

《aqp1和vegf在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、AQP1和VEGF在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达：张金红，张文芳，鲁建华，张书，梁丽【摘要】　　目的：研究大鼠视网膜缺血再灌注损伤后水通道蛋白1和血管内皮生长因子的表达情况并探讨二者在视网膜缺血再灌注损伤中表达的意义。方法：通过提高眼内压的方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型，于术后6，12，24，48h；3，7d用免疫组化的方法检测水通道蛋白1和血管内皮生长因子在大鼠视网膜的表达情况，并以正常大鼠视网膜作为对照。结果：正常对照组大鼠视网膜未能检测到血管内皮生长因子的阳性表达，缺血再灌注12h后开始出现表达，48

2、h达高峰，且差异具有统计学意义（P<0.01）。水通道蛋白1在正常对照组可见到阳性表达，缺血再灌注组随时间增长表达不断增强，7d在外层视网膜也出现表达，差异有统计学意义（P<0.01）。结论：水通道蛋白1和血管内皮生长因子在视网膜缺血性疾病中起着重要的作用，二者可能共同影响了视网膜的水代谢过程。【关键词】水通道蛋白1；血管内皮生长因子；缺血再灌注；大鼠　　Abstract　AIM:Toinvestigatetheexpressionlevelsandsignificanceofaquaporin1

3、(AQP1)andvascularendothelialgroiareperfusioninjury(RIRI).METHODS:ThemodeloftransientRIRIoftheratretinaeasured6,12,24and48hours,3,7daysafterretinalischemiausingimmunohistochemicalstaining.Normalretinaalgroupandbegantoexpressafter12hoursinischemiagroup,increased

4、graduallyandreachedmaximallevels48hoursafterRIRI.Thereiareperfusiongroup(P<0.01).AQP1positivecellsalgroup,increasedgraduallyinischemiareperfusiongroupandalsoayplayanimportantroleinvariousblindingischemicoculardiseases,andcoeffecttheetabolismofretina.　　KEYi

5、areperfusion;rat　　0　引言　　视网膜血管性疾病包括视网膜中央动脉/分支动脉阻塞，静脉阻塞，早产儿视网膜病变，糖尿病性视网膜病变等，以及临床常见的闭角型青光眼急性发作和一些影响视网膜血流的内眼手术，这些疾病和手术均存在着不同程度的视网膜缺血再灌注损伤（retinalischemiareperfusioninjury，RIRI），其造成视网膜的水肿是影响患者视力恢复的主要因素之一。水通道蛋白1（aquaporin1，AQP1）作为一种调节水分子跨膜转运的膜蛋白，维持体内水的渗透平衡[1]。其异常表达

6、，打破了视网膜组织对水的调解平衡，并在缺血缺氧的过程中诱导新生血管的生成，导致了视网膜的水肿[2,3]。血管内皮生长因子（vascularendothelialgroL/kg腹腔注射麻醉，麻醉满意后，将大鼠取俯卧位固定于鼠台上，随机选取每只大鼠的1眼造模，10g/L地卡因点眼局部麻醉，复方托吡卡胺散瞳，用氯霉素滴眼液冲洗结膜囊，将连接生理盐水瓶输液管的4号半头皮针沿颞侧角巩膜缘刺入大鼠眼前房，避免损伤虹膜和晶状体，胶布固定头皮针于大鼠同侧耳缘处。缓慢升高输液瓶至与大鼠实验眼垂直距离150cm处,此时眼压110mmHg(

7、1mmHg=0.133kPa)，可见球结膜及虹膜迅速变白，视网膜颜色苍白，说明视网膜中央动脉的供血完全阻断。氯霉素眼液滴眼以保持角膜湿润并预防感染。持续形成高眼压造成视网膜缺血60min后，缓慢降低输液瓶高度至大鼠眼球水平，使眼压缓慢降低。关闭输液器，拔出输液针头，虹膜及球结膜颜色迅速恢复正常，眼底视网膜恢复橘红色，说明受阻血流重新开放，已形成再灌注。术毕结膜囊涂红霉素眼膏待清醒后回笼。实验主要试剂：兔抗大鼠AQP1多克隆抗体（SantaCruz公司），鼠抗VEGF单克隆抗体（SantaCruz公司），生物素化的羊抗

8、兔和兔抗鼠IgG（北京中杉金桥生物技术有限公司），DAB显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。光镜制片：缺血再灌注组和正常对照组均用过量麻醉处死大鼠，在大鼠眼球3∶00或9∶00方位做好标记后，迅速摘除眼球，保留视神经0.5～1mm，置于40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液(pH7.4)内4℃固定24h，去除眼前节，梯度乙醇脱水和二