大鼠原位肝移植模型的手术技巧

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1、大鼠原位肝移植模型的手术技巧【关键词】原位肝移植；动物模型；大鼠Abstract：ObjectiveToimprovetheoperationtechniquefororthotopiclivertransplantationinrats,andillustratethehepaticischemia-reperfusioninjuryinfuturestudy.MethodsOnehundredandtenmaleSDratlypairedasdonorandreceptorandedodifiedKamada’storethan7daysand

2、7onessurvivedlongerthan100days.ConclusionExtremepatienceandskillfulsurgicaltechniquesarenecessaryforratorthotopiclivertransplantationmodel,ia-reperfusioninjury,transplantationimmunityandorganpreservation.Keyalmodel;ratStarzl于1963年首先为一先天性胆道闭锁的儿童施行肝脏移植手术后，肝移植术已逐渐成为各种急慢性肝功能衰竭的有效的

3、治疗手段，但肝脏缺血再灌注损伤仍不可避免，并已成为移植肝功能不佳或原发性无功能的主要原因，在术后1周内需再次行肝移植的患者中移植肝无功能约占81%［1］。大鼠肝脏移植模型是研究肝脏缺血再灌注损伤、移植免疫、器官保存等基础理论的理想模型，对于进一步探讨围术期肝脏缺血再灌注损伤具有重要的意义。目前国内关于大鼠肝移植模型建立的文章已比较多，本文主要从手术细节方面具体讨论手术技巧和需要注意的问题。1材料与方法1.1材料供受体均采用封闭群SD雄性大鼠，购自第二军医大学实验动物中心，重200~250g，实验室清洁级饲养，随机配对后以体重较轻者为供体。门静脉袖套

4、采用内径2.2mm，外径2.6mm的套管鞘，袖套长约3mm，下腔静脉袖套使用内径3.0mm，外径3.6mm的聚乙烯奶品吸管，袖套长3mm，袖套均留2mm柄部供夹持，以刻槽器在管壁上刻槽以防止打结时丝线滑脱。胆总管套管应用外径1mm的一次性硬膜外麻醉导管，长6mm，两端修剪成斜面。显微器械购自上海手术器械厂。结扎线用5－0普通丝线，血管缝合线用7－0号丝线，均购自上海金环医疗用品厂。灌注及保存液均为4℃乳酸钠林格液，其中每ml灌注液中含肝素25U，地塞米松20μg；肝素化液为4℃生理盐水，每ml含肝素50U。1.2手术方法1.2.1供体按照改良Kam

5、ada法［2］行大鼠原位肝移植术。乙醚吸入麻醉成功后，腹腔内迅速注射苯巴比妥（50mg/kg），大鼠取仰卧位，腹部大十字切口，剑突牵引，置腰垫，将肠袢移至腹腔外左侧，覆盖湿纱布，远离肝脏剪断肝镰状韧带、冠状韧带，游离并双结扎离断左膈下静脉。游离肝盘状乳头突表面韧带以充分暴露盘状乳头突。双结扎离断食管静脉，离断肝胃韧带，游离肝动脉并挂线待灌注后打结。分离胆道，距离左右肝管汇合部1.5cm处插管，结扎后远端剪断，留牵引线一根备用。暴露幽门静脉并挂线待灌注后打结。剪开肝尾状叶的韧带和下腔静脉以及肾静脉表面的后腹膜及结缔组织膜，暴露肾静脉并双重结扎离断。将

6、左肾静脉至肝尾叶之间的下腔静脉完全游离，肝尾状叶后部穿线结扎右肾上腺静脉，然后剪开右侧肝食管韧带。暴露右腰静脉，注入4℃肝素生理盐水2ml，棉球按压止血；将后腹膜分离至腹主动脉分叉处，约肝素化后2min由腹主动脉分叉处穿刺置入套管针。剪开膈肌，夹闭胸主动脉，剪开心脏及下腔静脉胸内段，在套管针穿刺点以下剪开下腔静脉，匀速注入4℃灌注液20ml，同时在供肝表面缓慢浇冰水保持低温。依次结扎并离断肝动脉和幽门静脉。钝性游离门静脉，并在脾静脉水平以喇叭形切口离断。剪断膈肌，稍微提起肝脏钝性游离下腔静脉在左肾静脉水平以喇叭形切口离断。以林格液保存在不锈钢碗并置

7、入4℃冰箱中。1.2.2修肝将不锈钢碗放在自置冰槽中，修剪肝下下腔静脉，剔除多余结缔组织后套入袖套，然后同法处理门静脉，将套管针置入门静脉袖套处，注入4℃林格液10ml，进一步冲洗肝脏并观察是否有冲洗液由肝上及肝下下腔静脉流出。沿肝上下腔静脉内壁剪除胸内段下腔静脉，然后将肝上下腔静脉前壁的肌肉全部剪掉，后壁则保留部分膈肌。左侧穿一较长血管缝合线供缝合，右侧穿一短血管缝合线供牵引。供肝保存于4℃。1.2.3受体受体术前应禁食8~10h，麻醉前10min肌注阿托品0.03mg，乙醚持续吸入维持麻醉。取腹部纵切口，胸骨柄根部结扎并牵拉以利于暴露，以自制“

8、U”型拉钩牵引双侧肋弓。彻底止血，肠袢移至腹腔左侧，以温盐水纱布包裹。基本处理同供体，不同点在于直接结扎并离断肝动脉，不处