apoe基因多态性、hscrp与冠心病的相关性

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1、ApoE基因多态性、hsCRP与冠心病的相关性【摘要】目的分析载脂蛋白E（ApoE）的基因多态性、高敏C反应蛋白（hsCRP）含量与冠心病的相关性。方法采用酚氯仿抽提核酸法从凝血块中分离,应用聚合酶链反应（PCR），Hha1内切酶消化法对94例冠心病患者和100例健康对照组进行ApoE基因多态性进行检测；采用生化全自动仪，以乳胶增强免疫透射比浊法检测血清hsCRP含量。结果①ApoE等位基因频率：冠心病组与对照组比较，ε2等位基因频率明显降低（P＜0.01），ε4等位基因频率升高（P＜0.0

2、05）；②血清hsCRP浓度，冠心病组显著升高（P＜0.05），但不同等位基因之间，hsCRP无显著性差别（P＞0.05）。结论联合监测ApoE基因多态性及血清hsCRP含量，对心血管疾病危险性的预测是敏感及有价值的指标。【关键词】载脂蛋白E；基因多态性；高敏C反应蛋白；冠心病　　【Abstract】ObjectiveToanalyzethepolymorphismofapolipoproteinE(ApoE),andhighsensitivityCreactive　protein(hs

3、CRP)levelsandtherelevanceofcoronaryheartdisease(CHD).MethodsPhenolchloroformextractiontheisolatedblocksbloodcoagulation.Polymerasechainreaction,Hhalendonucleasedigestionorphism.HsCRPleveleasuredbyimmunelatextransmissionturbidity.Results①ApoEallelefreq

4、uency:paredhsCRPconcentrationinCHDgrouporphismandserumhsCRParethesensitiveandvaluableindicators,orphism;HighsensitivityCreactive　protein;Coronaryheartdisease　　冠心病(CHD)是常见的多发病,是心血管系统疾病常见的死亡原因之一。研究认为，载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与CHD有一定的相关性〔1～3〕，冠状动脉粥样硬化并不是一种简单的脂质

5、沉积疾病,炎症是其重要特征,因此,CHD是一种炎性疾病。高敏C反应蛋白(hsCRP)与CHD的关系逐渐被临床广泛关注。本文对94例CHD患者血液进行AopE基因多态性及hsCRP浓度检测，旨在研究血清hsCRP、ApoE基因多态性与CHD的相关性。　　1对象与方法　　1.1研究对象CHD组94例，其中壮族42例，汉族52例，均为右江民族医学院附属医院心内科2007年1月至2007年8月住院CHD患者；男59例，女35例，年龄44～77岁，平均（60±12.7）岁，全部符合1979年世界卫生组织

6、修订的CHD诊断标准。对照组100例，均为同期住院的非CHD患者，并排除心脑血管疾病及肝、肾、内分泌等影响脂质代谢的疾病；男56例，女44例，年龄45～80岁，平均（65±10.8）岁。所有受试者在实验前均知情同意自愿参加本实验。　　1.2方法　　1.2.1ApoE基因多态性的检测　　1.2.1.1DNA提取采空腹静脉血2.5～3.0ml，EDTA抗凝，用低渗溶血酚氯仿抽提白细胞核酸DNA，双蒸水溶解后作为模板。　　1.2.1.2聚合酶链反应（PCR）扩增引物设计，而各等位基因组间无显著差异。　　

7、表1ApoE基因型和等位基因频率比较（略）　　与对照组比较：1）P＜0.01；2）P＜0.05　　2.2ApoE的基因型测定PCR扩增产物经Hha1酶切后，显示有不同的片段长度组合，可以进行ApoE基因型测定，即PCRRFLP分析方法。PCR扩增产物位于ApoE基因第4外显子内，涵盖2个突变位点〔6〕，产物长度为227bp。纯合子E2/2在91，81bp出现荧光条带；E3/3在91，48bp出现荧光条带；E4/4在72，48bp出现荧光条带；杂合子E4/2在91，81，72，48bp出现荧光条带；

8、E3/2在91，81，48bp出现荧光条带；E4/3在91，72，48bp出现荧光条带。见图1。　　1:E3/3,2：E2/3,3：E2/4,4：E2/2,5：E3/4,6：E4/4；M：Marker　　图1CHD患者ApoＥ不同基因型电泳图（略）　　表2ApoE等位基因多态性与血清hsCRP含量关系（略）　　与对照组对应等位基因比较：1）P＜0.05　　3讨论　　ApoE基因有3个等位基因，即ε2，ε3和ε4，共构成6种不同的基因型：3种纯合型（ε2/ε2，ε3/