非小细胞肺癌组织survivin和caspase

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1、非小细胞肺癌组织Survivin和Caspase【摘要】目的探讨Survivin和Caspase3基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其相互关系。方法应用免疫组织化学等技术与方法检测74例NSCLC组织细胞中Survivin和Caspase3基因的表达。结果在NSCLC组织细胞中，Survivin基因表达率为64.9%(48/74),其表达与NSCLCTNM分期、淋巴结转移和细胞分化程度密切相关（χ2=5.00～5.20，P<0.05）；Caspase3基因表达率为55.4%(41/74),其表达与淋巴结转移密切相关（χ2=5.98，P<0.05）；在N

2、SCLC组织细胞中，Survivin基因表达与Caspase3基因表达呈高度负相关(r=-0.404，P<0.01)。结论在NSCLC组织细胞中，Survivin基因表达上调，Caspase3基因失活或低表达；Survivin结合激活的Caspase3，抑制其活性，阻止细胞凋亡；Survivin基因表达预示肺癌组织有较高的侵袭性和预后不良。【关键词】基因Survivin基因Caspase3癌非小细胞肺免疫组织化学　　［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetheexpressionsofSurvivinandCaspase3geneand

3、theirrelationshipinnonsmallcelllungcancer(NSCLC).MethodsTheexpressionsofSurvivingeneandcaspase3genein74paraffinembeddedNSCLCsamplesmunohistochemically.ResultsSurvivinphnodeinvolvement,andcelldifferentiation(χ2=5.00-5.20,P<0.05).Caspase3phnodeinvolvement.TheexpressionofSurvivina,nonsm

4、allcelllung;Immunohistochemistry肺癌是最常见的原发恶性肿瘤，是一种严重威胁人类健康的常见病。有研究认为,Caspase3基因的低表达有助于肿瘤的发生。Survivin作为新近发现的凋亡抑制蛋白，在绝大多数人类肿瘤细胞中都有高表达[1]，可通过抑制Caspase3的凋亡作用而致癌。本研究采用免疫组化等技术与方法研究非小细胞肺癌（NSCLC）组织细胞中Survivin和Caspase3基因的表达及其相互关系，探讨Survivin和Caspase3在肺癌发生发展中的作用。现将结果报告如下。　　1材料与方法　　1.1标本我院胸外科手术切除的NS

5、CLC组织标本74例，其中男54例，女20例；年龄31～76岁，平均56.1岁。所有病人术前均未接受过化疗和放疗。经病理学检查证实为肺癌，其中鳞癌42例，腺癌32例；低分化30例，中分化和高分化癌44例。根据国际抗癌联盟1997年修订的肺癌分期标准：Ⅰ期＋Ⅱ期40例，Ⅲ期＋Ⅳ期34例；伴有淋巴结转移者52例，无淋巴结转移者22例。　　1.2主要实验试剂Survivin多克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司，Caspase3多克隆抗体购于北京博菲康生物技术有限公司，多聚赖氨酸玻片处理剂购于武汉亚法生物有限公司。　　1.3方法石蜡标本制成3μm厚的切片。常规脱蜡，梯度乙醇脱水，微

6、波抗原修复，内源性过氧化物酶阻断15min，分别滴加Survivin多克隆抗体(1∶125)和Caspase3的多克隆抗体(1∶100)，置27℃孵育60min，Ⅱ抗37℃孵育30min，Ⅲ抗37℃孵育30min，DAB显色4～8min，苏木精复染后，脱水、透明、封固后光镜下观察。用已知的阳性切片染色作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。　　1.4免疫组化阳性细胞的观察和图像分析采用半定量方法测定Caspase3、Survivin基因表达[2]。选取5个高倍镜视野(200倍)计数1000个肿瘤细胞中Caspase3、Survivin表达阳性细胞数，分为以下4个等级:

7、0级≤5%，5%<1级≤25%，26%<2级<60%，3级>60%。根据Caspase3、Survivin免疫组化染色的强度分成以下3个等级：弱阳性(显色淡黄或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色)=1；中等阳性(显色强度介于弱阳性与强阳性之间)=2；强阳性(多数细胞呈棕黄至棕褐色染色)=3；以阳性细胞数分值与染色强度分值的乘积为每一例的积分，积分0～1分为表达阴性(-)，2～3分为表达弱阳性(+)，4～6分为表达中度阳性()，>6分为表达强阳性()。弱阳性归为阴性