2种微藻总rna提取方法的比较

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1、2011年5月热带农业科学第31卷第5期May．2011Vol．31,No．5CHINESEJOURNALOFTROPICALAGRICULTURE2种微藻总RNA提取方法的比较①李亚军1)②费小雯1,2)邓晓东1)③(1中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口5711012海南医学院理学院生化教研室海南海口571101)摘要以微茫藻和莱茵衣藻为材料，比较Trizol试剂法和SDS-LiCl沉淀法提取2种微藻总RNA的效果，以期筛选出适合微藻RNA的提取方法。结果表明，SDS-LiCl沉淀法能从微茫藻中提取高质量的RNA，而

2、Trizol法和SDS-LiCl沉淀法均能从莱茵衣藻中获得高质量的RNA，但Trizol法更为简单有效。RT-PCR结果表明，SDS-LiCl沉淀法提取的微茫藻总RNA和Trizol法提取的莱茵衣藻总RNA都能直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。关键词RNA提取；微茫藻；莱茵衣藻；Trizol试剂法；SDS-LiCl沉淀法；分类号Q946.2；Q949.2TwoProtocolsforTotalRNAExtractionfromMicroalgae)1LIYajun)1,2FEIXiaowen)1DENGXiaodo

3、ng（1InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,CATAS,Haikou,Hainan5711012DepartmentofBiochemistry,HainanMedicalCollege,Haikou571101,China）AbstractToselecttheoptimumextractionmethodfortotalRNAfrommicroalgae,TrizolmethodandSDS-LiClmethodwereusedwithChlamydomonasrein

4、hardtiiandMicractiniumpusillumasmaterials.Theresultsshowedthat,high-qualityRNAfromM.pusillumwasobtainedbyusingSDS-LiClmethod.Incontrast,bothTrizolmethodandSDS-LiClmethodweresuitablefortotalRNAextractionfromC.reinhardtii.However,theformerismoresimpleandefficientthanth

5、elatter.TheRT-PCRresultsshowedthattotalRNAisolatedfromM.pusillumbyusingSDS-LiClmethodandfromC.reinhardtiibyusingTrizolmethodcouldbedirectlyusedformolecularbiologyexperiments，suchasmolecularcloningandgeneexpressionanalysis.KeywordsChlamydomonasreinhardtii;Micractinium

6、pusillum;RNAextraction;SDS-LiClmethod;Trizolmethod微藻是一类在显微镜下才能辨别其形态的单细素、藻蓝蛋白和活性多糖等，可以用来生产保健食胞或简单多细胞生物，在陆地和海洋分布广泛，迄品和药物[7]。鉴于微藻拥有的巨大开发价值和经济今已发现3万余种。在医药、食品、生物能源、农潜力，微藻生物技术领域也得到了迅速发展。微藻业及环境保护等诸多领域，微藻具有重要的开发利总RNA的提取是进行分子生物学研究的必要前提，用价值。利用微藻不仅可生产生物柴油和氢气等再基因的克隆和表达等研究都需要高质量的

7、RNA。但生能源[1-3]，还可减排CO2和净化污水[4-5]。微藻直是微藻种类繁多，且大多具有坚硬的细胞壁，有的接作为饵料已成功应用于水产养殖业中[6]，同时微藻还含有大量的多糖和酚类物质，这些都严重干，微藻细胞中富含DHA和EPA等不饱和脂肪酸、虾青扰总RNA的分离和纯化。目前，微藻总RNA的提取①基金项目：国家自然科学基因(No.30960032)；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(No.ITTBZD09-41)收稿日期：2011-03-05；责任编辑/高静；编辑部E-mail：rdnk@163.com。

8、②李亚军(1980～)，女，博士，研究方向：藻类分子生物学。③通讯作者：邓晓东(1969～)，男，博士，副研究员，硕士生导师，研究方向：藻类学。E-mail:xiaodong9deng@hotmail.com。-24-李亚军等2种微藻总RNA提取方法的比较一直是