白藜芦醇联合5论文

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1、白藜芦醇联合5论文李燕，邢克飞，李福洋，汪云，药立波，刘新平【关键词】白藜芦醇ApoptosispromotingeffectofresveratrolbinedanbreastcancercelllineMCF7【Abstract】AIM:ToinvestigateanbreastcancercelllineMCF7invitro.METHODS:Fourbreastcancercelllines(MCF7,MDAMB231,SKBR3andBcap37)easuredbyMTTassayan

2、dcellmorphologicalchangeicroscope.Apoptosisetry(AnnexinV/PIstaining)analysisandHoechst33258staining.RESULTS:Resveratrolcouldinhibitthegrool/L,respectively.TheIC50valueof5FUinMCF7cellsol/L.CF7cellsincreasedberofapoptoticMCF7cellscalculatedetryotherape

3、uticmedicinefortreatingbreastcancer.【Keyotherapy;apoptosis;breastneoplasms【摘要】目的：研究白藜芦醇联合5FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用.方法：4种人乳腺癌细胞系（MCF7，MDAMB231，SKBR3和Bcap37）与不同浓度的白藜芦醇或／和5FU共孵育48h.freelol/L.单用5FU对MCF7细胞的IC50为13μmol/L，联合使用5FU和白藜芦醇的IC50分别为9μmol/L和3μmol/L.与单用组

4、相比，65μmol/L白藜芦醇和13μmol/L5FU联合使用后，MCF7细胞AnnexinV水平升高.Hoechst33258荧光染色和流式细胞术分析MCF7细胞的结果一致.结论：白藜芦醇与5FU合用可协同促进MCF7细胞凋亡，提示白藜芦醇可能用作治疗乳腺癌的二线化疗药.【关键词】白藜芦醇；化疗；细胞凋亡；乳腺癌0引言中药植物的提取物与化疗药物的合理配伍，可大大提高肿瘤治疗的疗效.白藜芦醇(resveratrol)化学名称为芪三酚，化学结构为3，5，4’三羟基二苯乙烯(3，5，4’_trihy

5、droxystilbene)，分子式C14H12O3，Mr128.25，属非黄酮类多酚化合物，白藜芦醇可拮抗消化、血液、呼吸、生殖等多个系统来源的多种肿瘤细胞的增殖［1-4］，对肿瘤细胞的发生、促进、发展3个阶段均有抑制作用［1］.本研究将白藜芦醇与临床常用化疗药5FU联合应用，观察其对5FU在促进细胞凋亡中的增效作用.1材料和方法1.1材料四种人乳腺癌细胞系MCF7，MDAMB231，SKBR3和Bcap37均为本室保存细胞；白藜芦醇（纯度大于99％，溶于500g/L的丙二醇）由西安绿康天然药

6、物研究所提供，用时用含10％小牛血清的RPMI1640细胞培养液稀释至工作浓度；5FU购于第四军医大学附属一院西药房；RPMI1640培养基为美国Gibco公司产品；小牛血清购自杭州四季青生物材料工程有限公司；四氮唑溴盐（MTT）、AnnexinV/PI双标试剂盒和Hoechst33258购自美国Sigma公司；其余试剂均为国产分析纯.BX60荧光显微镜和倒置相差显微镜及照像系统为日本Olympus产品；遥控酶标分析仪为奥地利TECAN公司产品；FACSCalibur流式细胞仪为美国BD公司产品

7、.1.2方法1.2.1MTT法测定细胞存活率参考Yamaue等［5］的方法采用对数生长期的细胞，倾出其培养液，用PBS洗细胞3次，加适量的胰蛋白酶消化并细胞计数后，将细胞按4×103~6×103/孔（不同种类细胞接种密度不同）分组加入96孔培养板，每孔200μL.按细胞系、化疗药品种及药物浓度分组，白藜芦醇实验组分为6个浓度组：2,20,40,80,200和400μmol/L；5FU实验组参照其在人体的血浆高峰浓度，选择其最高峰值浓度的0.1~20倍范围，分为6组：8,80,160,320,80

8、0和1600μmol/L；联合用药实验组分为6组，分别是8,80,160,320,800和1600μmol/L5FU与65μmol/L白藜芦醇联用.每种药物浓度接种5复孔，每组设阴性对照组（培养液中只有细胞，无药物）和空白对照组（培养液中只有等量的药物，无细胞）.细胞常规培养24h后，将培养液换成含不同浓度药物的培养液，培养板置于CO2培养箱，在37℃，50mL/LCO2条件下继续培养48h，倒置相差显微镜观察细胞生长状态并拍照.然后取出全部培养板，每孔加入MTT溶液（5g/L）20μL，再继续