不同溶剂对蜂胶黄酮提取率影响的研究论文

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1、不同溶剂对蜂胶黄酮提取率影响的研究论文张云香,杨志孝,安蔚,王家富【关键词】溶剂摘要:目的检测泰山蜂胶提取液中总黄酮含量。方法用不同浓度乙醇做溶剂,采用超声波法提取泰山蜂胶,利用紫外分光光度法对泰山蜂胶提取液中总黄酮含量进行定量分析同时用原子吸收-分光光度法检测了提取液中铅含量。结果不同浓度乙醇的蜂胶提取率和黄酮含量不同,且铅含量均小于1μgg-1。结论泰山蜂胶的黄酮含量较高,具有较高的药用价值。关键词:泰山蜂胶;提取液;总黄酮;定量分析蜂胶是蜜蜂采集松树、杨树等植物的芽苞分泌物、树脂等.freelethanol)为分析纯;高氯酸

2、(HCLO4)为优级纯;乙醇(alcohol)浓度95%;水为三蒸水。1.2方法1.2.1蜂胶提取方法采集的新鲜粗蜂胶置-20℃过夜后粉碎,分别用三蒸水、浓度为24%,30%,70%的乙醇与蜂胶按固液比1∶4的比例浸泡1h,于超声波清洗器中超声20min,静置2h,再超声20min,静置2h后,过滤至上清液澄清,倒入棕色瓶中低温保存备用。四种浓度乙醇提取液以下依次简称为l,分别加入四个已经准确称重的干燥空烧杯中,在恒温电热套中加热,待干燥后称重,减去空烧杯的重量,即为提取液中蜂胶得率。见表1。表1四种不同浓度乙醇蜂胶提取率(略)1

3、.2.3四种蜂胶提取液中总黄酮含量测定按芦丁标准品法[3]。仪器使用S-54紫外分光光度计。测定波长420nm。标准曲线的绘制:精确称取芦丁50mg加15ml甲醇溶解,转移至50ml的容量瓶中定容,该标准贮备液浓度为1mg/m1AlCl3显色分别配制浓度为0.0,10.0,20.0,30.0,40.0,50.0μg/ml系列溶液,从图1可看出在芦丁的最大吸收波长420nm处测定吸光度最稳定。以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,计算机自动绘制工作曲线见图2,并确定浓度方程为:C=38.739A+0.329,相关系数r=0.9967。样品

4、测定:分别移取蜂胶提取液各200μl,70%乙醇提取液取10μl,各加0.5ml2.5%的AlCl3和0.8ml1%KCl,用乙醇定容至5.00ml,摇匀后静止30min后进行测定,直接读取浓度并根据下列公式求算出原液的含量。见表2。表2四种不同浓度乙醇蜂胶提取液中总黄酮含量(略)1.2.4蜂胶提取液中重金属铅含量测定将四种提取液分别在恒温电热套中加热,待干燥后称取200mg加入混合酸10ml(HNO3与HClO43∶1混和),低温消化至澄清无色液体,水浴加热驱酸,近干,加少量亚沸纯蒸水定容上机检测。结果见表3。表3四种不同浓度乙

5、醇蜂胶提取液中铅含量(略)2结果表1结果显示,70%乙醇提取蜂胶得率最高,且有随乙醇浓度降低提取率减少的趋势。从表2可见,70%乙醇蜂胶提取液中黄酮含量明显高于其他组,且四组提取液中黄酮含量与蜂胶得率成正比。从表3可看出,四组提取液中铅含量均小于1μgg-1。3讨论蜂胶具有多种生物学效应和药理作用,是一种具有广泛开发前景的药物。对肿瘤的预防和治疗作用已得到肯定[4]。对支气管哮喘、咽喉炎有预防治疗作用对幽门螺旋杆菌的抑制作用也得到证实[5,6]。蜂胶的化学成分非常复杂,由于受生态环境和气候条件的影响,植物渗出物和分泌物的不同造成不

6、同地区采集的蜂胶化学成分又相差很大,生物学活性也因此有所变化,因此应尽可能多的提取出有效成分,而剔除其杂质,方便更好地利用。蜂胶可以有效地溶于有机溶剂,如:甲醇、乙醚、乙醇、丙酮、醋酸乙酯等。但乙醚毒性大易挥发,丙酮易挥发刺激性大价格较贵,而正丁醇则价格较贵且难以从提取物中去除,醋酸乙酯具有刺激性气味,这些都使得它们不适宜用作提取蜂胶的提取溶剂,而乙醇作为一种溶剂具有无毒性、无不良气味、价格便宜、来源广和提取完成后可以从提取物中除净及乙醇回收率高等优点,因而本实验选取乙醇作为提取溶剂。其它如国内外用于药品和食品的蜂胶,大部分采用乙

7、醇作提取溶剂。当然在最近研究出的用超临界CO2流体萃取蜂胶的方法有许多优越性,但在实际工作中由于它的工艺较复杂,成本太高,还不适于生产应用。因此,用乙醇提取在目前仍是一种方便安全且经济有效的方法。本实验室采用超声波法配合提取蜂胶,两次超声20min后70%的乙醇对泰山蜂胶提取率和提取液中黄酮含量(分别为40.73%和28.62%),优于一次超声20min所得贵州蜂胶与黄酮含量(分别为20.69%和16.54%)[7]。曾有报道[8],水在4℃浸泡北京产蜂胶5d所得黄酮量为0.41%;用蒸馏水浸提杭州产蜂胶9d所得黄酮含量为0.80

8、%[9]。而本实验室利用超声波提取泰山蜂胶,水提取液中黄酮含量为3.35%,明显高于浸泡法。杭州蜂胶25%的乙醇浸泡5d黄酮提取率为1.11%,泰山蜂胶24%的乙醇超声波提取黄酮得率为7.28%。不同产地的蜂胶由于地理环境和气候及采集的季节不同,其

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