维生素e对噪声所致耳蜗毛细胞表达nf

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1、维生素E对噪声所致耳蜗毛细胞表达NF【摘要】目的探讨维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用及机制。方法以听阈、耳蜗基底膜铺片及免疫荧光染色为指标，观察大白鼠在稳态噪声持续暴露之前30天至暴露后7天，灌维生素E或生理盐水，对大白鼠听觉脑干电位分析和耳蜗外毛细胞（OHC）丢失率分析及NF-κB在耳蜗毛细胞中表达定量分析。结果维生素E在噪声暴露后大白鼠听力阈值明显低于单纯噪声组，OHC丢失率也明显降低，免疫荧光染色结果显示VitE干预组的耳蜗细胞表达NF-κB的强度低于单纯噪声组（P＜0.05）。结论维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用，通过上调耳蜗毛

2、细胞中NF-κB的表达。【关键词】噪声；耳蜗;毛细胞；维生素E；NF-κB【Abstract】ObjectiveTodiscusstheprotectionandmechanismofvitaminEintheratshearingimpairmentinducedbynoiseexposure.MethodsTaketheaudibilitythreshold、basilarmembranestretchedpreparationandimmunofluorescencestainastheindex,observingthattheratsinEandsodiumchlori

3、de,checktheauditorybrainstempotentialandthelostrateandNF-κBoftheOHCinthecochleahaircellsexpressionquantitativeanalysis.ResultsAfterthenoiseexposure,theratsinEhavesignificantlouchlomunofluorescencestaindemonstratethatthegrouphavevitaminEhaveloinEhasobviousprotectioninthehearingimpairmentofrats

4、,inE;NF-κB噪声可产生可恢复的暂时性阈移（TTS）或不可恢复的永久性阈移（PTS），甚至造成噪声性耳聋。对噪声性听力损伤机制迄今尚无明确报道。本实验在大白鼠噪声暴露前30天至暴露后7天灌胃维生素E，对其防止TTS转变为PTS及促进听力恢复有无保护作用进行探讨。分析维生素E干预噪声听觉损伤与耳蜗毛细胞中NF-κB表达的关系，确定VitE减少噪声引起的毛细胞死亡的分子机制。　　1材料与方法1.1动物分组与处理选择鼓膜正常,听觉脑干电位仪测4000Hz频率双耳听阈在23～28dB的健康雄性g/（kg·d）］。单纯暴露组在暴露前30天至暴露后7天连续灌胃生理盐水［5ml/（kg·

5、d）］。噪声暴露：连续用药30天后即行噪音暴露，将动物置于小笼内（40cm×30cm×30cm），每笼2只，放入暴露舱（0.5m×1.5m×0.5m），用UZ-3型噪声发生器发生，A-K200功率放大器放大，有位于暴露舱四周的扬声器向暴露舱播放。暴露时用声压计进行连续监测，噪音保持在频率为4000Hz，平均声强为116dBSPL（soundpressurelevel）。动物暴露范围内声扬不均匀度为±2dB。持续暴露6h。1.2听阈测试测试在隔音屏蔽室内进行，10%水合氯醛（330mg/kg）腹腔注射，麻醉生效后安插针式电极，记录电极的安装是用不锈钢针刺入前颅顶正中穿透皮肤至颅骨骨

6、膜，置于冠状缝中点处，同时给声耳及对侧耳后皮下分别刺入不锈钢针，作为参考电极和接地电极。TDH-39型耳机给声，声源距耳廓1cm，诱发电位用信号处理机叠加处理，进行测试：刺激声为交替短声（clicks），重复率10次/s。实验选用主要参数为：带道滤波为32Hz～3kHz，扫描时间为10ms，叠加为512次。测试声强由110dBSPL开始，接近阈值后按5dBSPL渐档递减，电生理反射由针式电极引出，经放大及处理后以波形的方式显示于荧光屏，阈值是以肉眼刚能辨认的脑干电位波群中以Ⅲ波的声强表示。1.3耳蜗基底膜铺片三组动物完成最后一次听阈测试后（噪声暴露停止后第7天）处死动物立即取出颞

7、骨,打开听泡,4%甲醛固定24h,10%EDTA脱钙1周,分离出基底膜,三组动物随机抽出各6只（12耳）,在常规苏木素染色,在放大400倍的光学显微镜下，以目镜中0.24mm显微测微尺为测量尺度，逐个视野从蜗底向蜗顶进行OHC记数。以OHC境界模糊或消失、细胞碎裂或缺失为OHC死亡标志。钩部和蜗尖各有4个视野不做记数。所得数据分析OHC损失分布情况。1.4免疫荧光染色三组动物基底膜各6只（12耳），用0.1mol/LPBS洗涤3次，每次5min，加入0.1%TritonX-100