丹参酮微乳中丹参酮ⅱa的含量测定论文

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1、丹参酮微乳中丹参酮ⅡA的含量测定论文【摘要】目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定丹参酮微乳中丹参酮ⅡA含量的方法。方法采用HypersilODS色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为甲醇-水（体积比为75∶25），检测波长为275nm，流速为1.0ml/min,柱温为30℃。结果丹参酮ⅡA在浓度为3.82～61.12μg/ml范围内线性良好，r=0.9999，方法回收率为98.65%～101.28%。结论该操作简单，结果可靠.freelanceliquidchromatographic(RPHPLC)methodinationofTanshinoneⅡAint

2、anshinonesmicroemulsion.MethodsChromatographyn(4.6mm×250mm，5μm)obilephaseofmethanol-e).TheUVdetection.ResultsThelinearrangeofTanshinoneⅡAl.Theaveragerecoveriesethodisreproducible,simple,preciseandsuitablefortheusualqualitycontrolmethodofTanshinonesmicroemulsion.Keyulsion；RPHPLC丹参为唇形科植物丹参Sa

3、lviamiltiorrhizaBge.的干燥的根及根茎，具有祛淤止痛、活血调经、清心除烦之功效，在临床上被广泛用于心脑血管系统疾病。丹参酮是从丹参中提取的脂溶性菲醌类成分，具有抑菌、抗氧化、抗动脉粥状硬化、减少心肌耗氧量、抑制体外肿瘤细胞增殖等作用［1］。然而丹参酮是疏水性物质，不溶于水，从而限制了其被吸收利用。微乳作为由油相、水相、表面活性剂相等组成的新型载药体系，具有生物利用度高、热力学稳定、外观透明、黏度低等优点［2］，并且油相可以增加疏水性药物的溶解度，因而可采用微乳载药体系来提高丹参酮的生物利用度。本实验建立了测定丹参酮微乳中丹参酮ⅡA含量的高效液相色谱法，该法简

4、便、准确，适用于常规分析。1仪器与试药LC6A高效液相色谱仪，SPD6AUV检测器，CR4A数据处理仪（均为日本岛津）。甲醇为色谱纯，水为双蒸水；丹参酮提取物由广州医药工业研究所提供，丹参酮ⅡA对照品购于中国生物制品检定所，空白微乳和丹参酮微乳由本室自制。2方法与结果2.1色谱及检测条件色谱柱为HypersilODS色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为甲醇∶水（体积比为75∶25）；检测波长为275nm；流速1.0ml/min,进样体积为10μl，柱温为30℃。在此条件下的色谱图见图1。2.2对照品和供试品的制备2.2.1对照品溶液取丹参酮ⅡA对照品适量置

5、于棕色量瓶中，加甲醇制成浓度为0.3056mg/ml的对照品溶液作为储备液，低温避光保存。2.2.2供试品溶液精密量取丹参酮微乳液2ml置于50ml棕色量瓶中，加甲醇稀释到刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液，并低温避光保存。2.2.3空白对照液按供试品溶液制备法制备。2.3线性关系考察分别精密吸取对照品储备液适量配制成含丹参酮ⅡA3.82，7.64，15.28，30.56，61.12μg/ml的对照液，依次进样10μl进行测定，所得丹参酮ⅡA的峰面积（A）对进样浓度（C）进行线性回归，回归方程为A=-19352.3+44450490C，r=0.9999，峰面积与进样浓度

6、线性关系良好。图1空白微乳色谱图、丹参酮ⅡA对照品色谱图、丹参酮微乳色谱图（略）2.4稳定性与精密度实验考察取丹参酮ⅡA对照品溶液，分别在0，2，4，6，8，10h进样，测得丹参酮ⅡA对照品峰面积RSD为0.99%；取丹参酮微乳液供试品溶液，按样品含量测定方法测定，连续进样5次，测得进样精密度RSD为0.62%（n=5）。2.5回收率实验分别在丹参酮微乳供试液中分别精密加入丹参酮ⅡA对照品溶液适量，配制成浓度为32.3，24.7，16.3μg/ml的低、中、高3种浓度的溶液。按照样品测定法进行测定，并计算回收率。结果见表1。表1丹参酮ⅡA加样回收率实验结果（略）2.6样品测定

7、精密吸取上述供试品溶液10μl，分别注入液相色谱仪中，按外标法计算含量。结果见表2。表2丹参酮微乳中丹参酮的ⅡA含量（略）3讨论微乳是由表面活性剂、助表面活性剂、油相和水相组成的稳定体系，当组分发生变化时会引起相变而被破坏。本研究的微乳可用蒸馏水无限稀释而未发生相改变，但被1.5～2.5倍体积的甲醇稀释时则引起相转变产生浑浊，然而微乳液可以溶于10倍体积量以上的甲醇，形成澄清透明的溶液。而且从空白微乳的色谱图可以看出，微乳载体的材料对丹参酮ⅡA的含量检测基本没有影响，检测时可以不必除去微乳载体的辅料。因