超声波辅助热回流技术提取马鞭石斛多糖的工艺研究论文

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1、超声波辅助热回流技术提取马鞭石斛多糖的工艺研究论文罗傲雪，何兴金，范益军，何涛，刘静，淳泽【摘要】目的优选超声波辅助热回流法提取马鞭石斛多糖工艺。方法以多糖的提取率作为指标，通过单因素及正交实验对提取工艺进行优化，主要考察因素为提取时间、温度和次数。结果超声波辅助热回流提取马鞭石斛多糖的最优工艺条件：温度95℃.freelin，提取4次，采用此工艺提取的马鞭石斛多糖提取率为（18.64±0.396）%，显著高于传统热回流法的提取率。结论该工艺具有良好的精密度和稳定性，重复性好，适用于马鞭石斛多糖的提取。【关键词】超声波辅助提取；多糖；马鞭石斛；提

2、取工艺Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofpolysaccharidefromD.fimbriatumHook.var.oculatumHookbyultrasonichotrefluxassisted.MethodsOnthebasisofsinglefactorexperiments,theextractionprocessizedbyorthogonalexperimentaldesignoneffectsofextractiontemperature,ultrasonic-i

3、rradiationtimeandextractiontimes.Theyieldofpolysaccharideumconditionsinedasfolloinat95℃andextractionfourtimes.Theextractionrateofpolysaccharidereached（18.64±0.40）%byusingthemethod,uchbetterthanhotrefluxextractionmethod.ConclusionThatthemethodissimpleD.fimbriatumHook.var.ocula

4、tumHook.KeybriatumHook.var.oculatumHook;Extractionprocess石斛为兰科石斛属植物，是一种重要的大宗中药材，民间将其称为药界大熊猫，与灵芝、人参、冬虫夏草等并称为“中华九大仙草”［1］。传统中医常将石斛用于滋阴清热、生津益胃、止咳润肺，而现代药理学研究发现石斛具有多种医药功效，可预防和治疗白内障，扩张血管、降血糖等［2，3］。石斛的有效成分主要是多糖和生物碱，其中多糖由于具有抗氧化［4］、免疫增强［5，6］和抗肿瘤作用［7］而成为研究热点。马鞭石斛是四川主产的石斛品种之一，资源非常丰富，被200

5、0年版和2005年版《中国药典》收载。初步研究表明，马鞭石斛中含有丰富的多糖类成分［8］，然而目前对马鞭石斛多糖的提取工艺及活性研究尚未见报道。本实验旨在热回流提取基础上，结合超声波辅助处理来研究马鞭石斛多糖的提取工艺，并通过对提取条件的优化，筛选最佳工艺，为马鞭石斛的进一步开发提供依据。1材料与仪器葡萄糖、苯酚、硫酸、乙醇、石油醚，均为分析纯试剂（成都科龙化工）。马鞭石斛（采自四川夹江，并经中国科学院成都生物研究所何涛副研究员鉴定），60℃下烘干并过40目筛。TU-1800S紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器）；RE-52A旋转蒸发器（上海亚

6、荣生化仪器）；HH-S数显恒温水浴锅（江苏金坛医疗仪器）；T214分析天平（北京赛多利斯仪器）；KQ-5200超声波发生装置（昆山超声仪器）；6202植物粉碎机（北京环亚天元机械）；AYJ1-1002-U艾柯浦纯水仪（重庆颐洋企业发展有限公司）。2方法2.1超声波辅助热回流提取流程马鞭石斛→60℃干燥→粉碎过40目筛→称取石斛干粉→石油醚回流去脂→80%乙醇回流去低聚糖→超声波辅助热回流提取→紫外分光光度计检测吸光度。2.2标准曲线的制备对照品溶液的制备：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品0.0250g，加水溶解，250ml容量瓶定容，即得

7、0.1mg·ml-1的葡萄糖对照品液。标准曲线的制备：精密量取上述对照品液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml于具塞试管中，分别加水至2.0ml，各加入5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5.0ml，摇匀，放置10min，置40℃水浴保温15min，取出迅速冷却至室温，紫外分光光度计490nm处测定吸光度，空白对照以2.0ml蒸馏水代替葡萄糖液。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：Y=0.0686X-0.0003（r=0.999）式中Y——浓度（mg·ml-1）；X——吸光度值（A）多糖的提取率按下式计算：多糖的

8、提取率（%）=浓度×稀释倍数×样品溶液体积样品质量×100%2.3单因素实验温度对多糖提取的影响分别考察40，50，60，70，80，9