重庆道地药材青蒿高效液相色谱指纹图谱研究

《重庆道地药材青蒿高效液相色谱指纹图谱研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、重庆道地药材青蒿高效液相色谱指纹图谱研究胥秀英，郑一敏，傅善权，韩玉梅，杨艳红【摘要】　　目的建立重庆道地药材青蒿高效液相色谱（HPLC）指纹图谱研究方法。方法采用反相高效液相色谱法，测定青蒿药材指纹图谱，色谱条件为：色谱柱：ShimadzuC18（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水梯度洗脱；流速：1.0ml·min-1；检测波长：206nm；柱温：25℃。结果建立了重庆道地药材青蒿指纹图谱标准。结论该指纹图谱方法简便、快速、重现性好，可作为青蒿药材的一项质控指标。【关键词】青蒿指纹图谱模糊模式识别高效液相色谱　　Ab

2、stract：ObjectiveToestablishanHPLCfingerprintanalysismethodforidentificationofArtemisiaannuaL.fromChongqing.MethodsThefingerprintinedbyHPLC.TheanalysisadzuC18column(150mm×4.6mm,5μm).Themobilephasel·min-1at206nmandtheseperationedat25℃．ResultsThestandardoffingerprintinArte

3、misiaannuaLethodissimple,fastandrepeatable.ItcanbeusedinqualityassessmentofArtemisiaannuaL.　　KeyisiaannuaL；Fingerprint；Fuzzypatternrecognition；HPLC　　青蒿为菊科植物黄花蒿ArtemisiaannuaL.的地上部分,味苦、微辛，性寒。具有清热、解暑作用。用于瘟病、暑热、骨蒸劳热、疟疾、痢疾、疮痒等〔1〕。生于旷野、山坡、河岸，分布于全国各地，是重庆道地药材之一。本实验利用HPLC法建立了以青

4、蒿素为参照峰的重庆道地药材指纹图谱，利用模糊模式识别软件计算各批药材相似度，为建立符合规模化生产的青蒿药材基地提供更多的科学依据。　　1仪器与试药　　ETTLERAE240电子分析天平。　　甲醇（色谱纯）；乙醇（药用）；其他试剂均为市售分析纯；水为纯净水，青蒿素对照品（批号0202-9501，供含量测定用）由中国生物制品检定所提供。　　共收集青蒿药材样品15批，均为重庆酉阳栽培品种，经本校傅善权副教授鉴定为黄花蒿ArtemisiaannuaL.的地上部分。　　2方法与结果　　2.1对照品溶液的制备取青蒿素对照品适量，用甲醇溶解制成1.

5、10mg·ml-1的对照溶液，作为参照物。　　2.2供试品溶液的制备称取青蒿药材10g，加50ml乙醇回流提取3h，滤过，再加25ml乙醇同法处理两次，滤过，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，加入相同体积的醋酸乙酯萃取3次，合并萃取液，浓缩至干，各取一定量，制成2.5mg·ml-1的溶液，0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液。　　2.3色谱条件　　2.4.2精密度实验取“2.2”项供试样品溶液，在上述色谱条件下，连续进样5次，记录指纹图谱。结果表明，各共有峰的保留时间的RSD为1.51%～2.91%，百分面积的RSD为1.94%～2.89%

6、，百分高度的RSD为1.47%～2.98%，符合中药指纹图谱研究的技术要求，表明该仪器精密度较好。　　2.4.3重现性实验取供试样品6份，按“2.2”项供试样品溶液制备方法制得供试样品溶液。在上述色谱条件下，分别进样10μl，记录指纹图谱。结果表明，各共有峰的保留时间RSD为1.23%～2.82%，百分面积RSD为1.02%～2.78%，百分高度RSD为0.98％～2.97％，符合中药指纹图谱研究的技术要求，表明样品重复性较好。　　2.4.4青蒿样品指纹图谱模式标准的建立分别取10批不同批号的青蒿药材，按供试品制备方法制备，在上述色谱

7、条件下各进样10μl，记录色谱图。经比较10批样品的色谱图，其中有11个峰为共有指纹峰。选择相对保留时间、相对峰面积、相对峰高为特征参数，计算各特征参数平均值，建立指纹图谱模式标准，见表2。　　表210批青蒿药材指纹图谱模式标准（略）　　2.4.5样品测定与相似度计算取5批样品,在相同色谱条件下测定，采用广义夹角余弦〔4〕，计算样品各共有色谱峰与标准模式中对应的色谱峰的相似度。结果各指纹图谱的相似度均大于0.9，即各批样品与所建立的模式标准有较好的相似性（见表3）。　　3讨论　　本实验对供试品溶液的制备方法、色谱条件进行了筛选。通过对

8、不同提取溶剂、提取方法进行比较，以文中供试品的制备方法，所得指纹图谱峰数较多。以甲醇-水梯度洗脱分离效果较好，能使样品中各色谱峰较好地分离且出峰较多。对青蒿素的测定，大多采用衍生化方法，本文采用190～400nm波长扫描