依达拉奉对大鼠肠缺血再灌注损伤保护作用的实验的研究

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时间:2018-11-29

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1、·汕头大学医学院硕士研究生毕业论文目录中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6材料和方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„8结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„16插图„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„23讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„27结论与展望„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„29

2、参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„30综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„33附录„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„45致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„46····第II页共46页····汕头大学医学院硕士研究生毕业论文摘要目的研究依达拉奉对大鼠小肠缺血再灌注后肠黏膜损伤的保护作用,并探讨其作用机制,为扩展其临床新用途提供实验依据。方法选用健康清洁级Wistar大鼠40只,雄性,体重260~300g(由汕头大学医学院实验动物中心提供)。实验动物饲养于汕头大学医学院实验

3、动物中心标准动物实验房,定期投予饲料、更换饮水瓶、垫料,适应性饲养7天后用于实验。实验动物随机分为4组(每组10只):①假手术组(A组):分离肠系膜上动脉后不作阻断;②缺血再灌注+生理盐水组(B组),夹闭肠系膜上动脉30分钟后再灌注60分钟,灌注前5分钟经尾静脉注射生理盐水0.5mL;③缺血再灌注+维生素C组(C组):夹闭肠系膜上动脉30分钟后再灌注60分钟,灌注前5分钟经尾静脉注射维生素C180mg/kg;④缺血再灌注+依达拉奉组(D组):夹闭肠系膜上动脉30分钟后再灌注60分钟,灌注前5分钟经尾静脉注射依达拉奉3mg/kg。所有实验动物术前24h禁食,允许自由饮水,以3%戊巴比妥纳麻醉

4、(30mg/kg)经腹腔注射进行麻醉。腹正中切口入腹,分离肠系膜上动脉,用无损伤血管夹夹闭肠系膜上动脉起始部30分钟后去除血管夹,再灌注60分钟。操作过程中所有动物腹腔注入37℃生理盐水0.5ml/kg,以保持血流动力学稳定。实验结束后立即分别抽取外周血3mL,立即4℃下4000rpm离心15分钟后取上清液,-70℃保存备用,做SOD、MDA测定;另取一部分肠标本,用生理盐水漂洗干净,电子天平秤取0.20g肠组织,按每1g湿组织(wettissue,WT)添加4℃生理盐水10mL的比例,低温下用高速搅拌分散机匀浆30秒后,立即4℃下4500rpm离心30分钟后取上清液,配制成10%的组织匀

5、浆,-70℃保存备用,做SOD、MDA测定。各组动物再灌注60分钟后处死,距回盲部25cm处取空肠1.0cm,10%福尔马林固定,梯度酒精脱水,透明后石蜡包埋、切片,以病理学改变作为评价肠粘膜损伤的指标。结果缺血再灌注后,B组血清的SOD含量为(59.30±13.29)U/mL,较A组(98.14±7.42)U/mL明显下降(P<0.01),与C组(71.71±16.61)U/mL比较,则差异无显著性(P>0.05),但D组(88.54±11.23)U/mL与之比较,则差异有显著性(P<0.01)。B组肠组织中SOD的含量为(346.02±29.47)U/mgprot,较A组(463.92

6、±16.22)U/mgprot明显下降(P<0.01),与C组(352.62±39.55)比较,则差异无显著性(P>0.05),与D组比较(378.42±32.10)U/mgprot,差异有显著性(P<0.05)。而B组的血清MDA含量为(13.05±3.11)nmol/mL较A组(7.19····第1页共46页····汕头大学医学院硕士研究生毕业论文±1.84)nmol/mL显著升高(P<0.01),与C组(10.56±2.35)nmol/mL比较则差别无显著性(P>0.05),与D组(9.24±2.04)nmol/mL比较,差别有显著性(P<0.01)。B组肠组织中MDA含量为(19.

7、51±4.62)nmol/mgprot较A组(10.93±1.54)nmol/mgprot明显上升(P<0.01),与C组(18.40±3.50)nmol/mgprot比较则差别无显著性(P>0.05),与D组(14.86±2.67)nmol/mgprot比较,差别有显著性(P<0.05)。D组在应用依达拉奉后,明显减少氧自由基的产生及SOD的消耗,降低了血液中氧自由基的终产物——MDA的水平,同时提高了机体内抗氧化物S

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