鬼臼毒素二元醇质体体外抗宫颈hpv感染的研究

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1、鬼臼毒素二元醇质体体外抗宫颈HPV感染的研究【摘要】目的研究鬼臼毒素二元醇�

2、体（POD-BE）体外抗宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的效果。方法采用超声注入法制备POD-BE，采用透析法测定POD-BE包封率（EE%），观察POD-BE形态学、外观性状及稳定性，运用CCK-8法和流式细胞术（FCM）分别检测POD-BE和POD处理后永生化人宫颈上皮细胞（H8细胞）的增殖和凋亡，以透射电镜和激光共聚焦显微镜（LCSM）分别观察细胞的形态变化及药物在细胞的分布。结果制备的POD-BE混悬液电镜下为类球状小囊泡，平均粒

3、径（84.6±9.2）nm，Zeta电位（-27.2±4.2）mV。保存在4℃冰箱内的POD-BE样本，6个月内仍保持半透明、质地均匀外观，未见沉淀及药物结晶析出。3000r/min离心20min未发现分层现象。而保存在室温下的样本，24h未见任何变化，3～6个月时出现少许混浊，震荡后样本恢复均一外观，未见药物结晶析出。POD-BE组和POD组均呈剂量和时间依赖性地抑制H8细胞的增殖。在相同浓度同一时间条件下，POD-BE组对H8细胞的增殖抑制效果明显强于POD组（P<0.01）。POD-BE组12、24、48h

4、的半数抑制浓度（IC50）分别为782、595、97μg/L，而POD组的IC50则分别为1966、1570、758μg/L；空白BE组对细胞无明显毒性。与空白对照组相比，POD-BE组和POD组均能明显诱导H8细胞凋亡（P<0.01）；然而POD-BE组诱导凋亡的效果则显著强于POD组（P<0.01）。10μg/L的POD-BE和POD分别处理H8细胞24h后，透射电镜下显示：H8细胞被药物处理后其染色质高度凝聚、边缘化，形成凋亡小体。H8细胞分别被POD-BE和POD处理24h后，两组的荧光均表现出聚集于细胞

5、核的趋势，且POD-BE组较POD组荧光信号强度显著增强，而空白BE组和空白对照组未见有阳性荧光信号表达。结论POD-BE具备理想的理化性质，POD-BE较POD对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果。中国6/vie　　【关键词】鬼臼毒素；二元醇质体；细胞凋亡；宫颈人乳头瘤病毒　　DOI：10.14163/j.ki.11-5547/r.2017.01.001　　Researchofpodophyllotoxinbinaryethosomesinexternalanti-cervicalHPVinfection

6、ZHONGShu-bin，edicalUniversity，Guangzhou510515，China　　【Abstract】ObjectiveToresearcheffectbypodophyllotoxinbinaryethosomes（POD-BE）inexternalanti-cervicalhumanpapillomavirus（HPV）infection.MethodsPOD-BEethod，andencapsulationefficiency（EE%）ofPOD-BEethod.Observatio

7、nadeonmorphology，externalpropertiesandstabilityofPOD-BE.CCK-8methodandfloetrymethod（FCM）ultiplicationandapoptosisofimmortalizedhumancervicalepithelialcell（H8cell）afterPODtreatment.Transmissionelectronmicroscopeandlaserscanningconfocalmicroscope（LCSM）orphologi

8、cchangeanddrugdistributionofcell.ResultsPreparedPOD-BEsuspensionshoallvesicaeunderelectronmicroscope，eangraindiameteras（84.6±9.2）mmandZetaelectricpotentialas（-27.2±4.2）mV.POD-BEsamplesin4℃refrigeratorshoitransparentandbalancedappearanceentanddrugcrystalsepara

9、tion.Nostratificationappearedafter20minofcentrifugationby3000r/min.Samplesinindoortemperatureshoonthsedependence.Undertheconditionofsameconcentration，POD-BEgroupshoedianinhibitoryconcentr