过敏性哮喘患者外周血il-17和il-23水平变化及临床意义

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1、过敏性哮喘患者外周血IL-17和IL-23水平变化及临床意义(武汉市汉口医院重症医学科湖北武汉430012)【摘要】目的：探讨过敏性哮喘患者外周血白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-23(IL-23)水平变化及其临床意义。方法：40例过敏性哮喘患者作为实验组，另选40例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)实验检测患者外周血中及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-17和IL-23的水平，并分析其于哮喘严重程度的相关性。结果：实验组患者血浆中和PBMC培养上清液中ILJ7和IL-23水平均明显高于对照组(P&t;0.05)o随着哮喘严重程度增加

2、，血浆中ILJ7的水平逐渐增加，具有显著性差异(P&t;0.05)o实验组患者血浆中和PBMC培养上清液中IL-17与IL-23水平均呈现正相关性(r=0.527,0.426;P=0.004z0.019)0结论：过敏性哮喘患者外周血IL-17和IL-23水平明显上升，IL-17和IL・23可能影响哮喘的发展，ILJ7水平或许可以用来辅助判断哮喘的严重程度。【关键词】过敏性哮喘；白介素J7；白介素临床意义【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2015)33-0057-02过敏性哮喘是一种由多种细胞和细胞因子介导的气道炎症性疾病，往往由尘嫡、花

3、粉、娣螂等过敏原引发产生，严重影响人们的身体健康和日常工作。有文献报道[1],辅助性T细胞(Th)17在过敏性哮喘的发生与发展中有至关重要的作用。Thl7细胞分泌的IL-17、IL-22等细胞因子在炎症性疾病中有重要作用，IL-17有促进炎性反应的牛物学功能，参与过敏性哮喘的发牛[2]olL-23是一个上游调控Thl7的因子，其能够诱导Thl7细胞分泌IL-17,从而参与过敏性哮喘的发牛和发展。木研究探讨过敏性哮喘患者外周血ILJ7和IL・23水平变化及其与哮喘严重程度的相关性，以期为临床上釆用诊断IL-17等因子判断疾病严重程度提供一定的科学依据。1•资料与方法1.1j

4、般资料选择2012年8月到2015年1月在我院就诊的40例过敏性哮喘患者作为实验组，其中男18例，女22例，平均年龄34.7±7・2岁。纳入标准：⑴症状符合中华医学会哮喘学组制定的《支气管哮喘防治指南》标准；⑵皮肤过敏原实验(尘！花粉、蝉螂等)阳性；⑶血清特异性IgE阳性。排除标准：⑴心、肝、肾功能不全者；⑵有心脏病及其他肺部疾病患者；⑶精神障碍者；⑷近期有呼吸道感染患者；⑸近期接收激素治疗患者。依照世界哮喘防治协会标准⑶，对40例哮喘患者进行严垂程度分级，其中轻度哮喘患者12例，重度哮喘患者14例，重度哮喘患者14例。另外选择40例健康体检者作为对照组，其

5、中男20例，女20例，平均年龄32.2±8・3岁,均无心脏病及其他肺部疾病、无近期有呼吸道感染、近期无接收激素治疗，均体检合格。两组患者年龄、性别等资料均无显著性差异(P>；0.05),具有可比性。患者均知情同意，并经医院伦理会批准。1.2主要仪器和试剂Lambda25型紫外分光光度计，购自美国PE公司；TC2323型细胞培养箱，购自美国Oregon公司；XD-202型倒置显微镜，购自南京江南永新光学有限公司；TG16-WS型台式高速离心机，购自上海赵迪生物科技有限公司。小牛血清，购自美国Sigma公司；人淋巴细胞分离液，购自挪威Oslo公司；IL-17

6、与IL-23酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒，购自美国RD公司。Hankj夜，由8gNaCL0.4gKCL0.06gNa2HPO4>0.06gKH2PO4和0.35gNaHCO3完全溶解于lOOOmL注射用水中配制而得。1.3PBMC的分离和培养PBMC的分离:采集患者外周静脉血12mL于加入肝素的离心管中,加入等量Hank溶液，混匀。在15mL规格离心管中加入3mL人淋巴细胞分离液，后加入混匀的外周静脉血6mL,放入高速离心机，于2000r/min,离心25miru后吸取离心管中从上到下第二层液体于新置离心管中，加入等量Hank溶液混匀,于1000r/min,离心l

7、Omin来洗涤细胞，洗涤两次，备用。PBMC的培养：将分离的PBMC洗涤后加于含有10%小牛血清的RPMI1640培养液中，适当调整细胞密度为1.5×106个/mL,悬浮培养。1.4检测指标采用ELISA法检测两组患者血浆中和PBMC培养上清液中IL-17和IL・23水平，具体操作步骤严格按照实际和说明书，所有样本和标准品均设定复孔oIL-17的最低检测限为3.2pg/mL,IL-23的最低检测限为8pg/mLo1.5数据处理使用SPSS19.0软件包处理数据，计量资料以均数±标准差(x-&plusm