IL-17、IL-25在哮喘患者外周血中的水平分布及其参与哮喘发病机制的探讨

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1、·中文论著摘要·IL．17、IL。25在哮喘患者外周血中的水平分布及其参与哮喘发病机制的探讨刖吾支气管哮喘(简称哮喘)是一种由多种细胞及细胞因子参与的慢性炎症性疾病，以肺部可逆性阻塞、气道黏膜炎症和气道高反应性为特征。哮喘的发病机制至今仍不明确。研究认为细胞免疫反应产生的多种多功能细胞因子可能在哮喘发病中发挥重要作用。T细胞被认为是哮喘发病机制中关键的枢纽环节。目前已知有多种细胞因子参与哮喘形成和发展过程，Thl／Th2的失衡被认为是哮喘发病的关键机制。近年来，新的细胞因子不断被发现，如主要来源人类记忆T细胞的IL．17(IL．17A)；由Th2细胞产生，可诱导IL．4，I

2、L．5，IL．13基因表达的IL．25(IL一17E)，二者均属白细胞介素17家族(Interleukin17family，IL．17家族>成员。有报道它们与哮喘发病相关，但其作用机制尚不清楚，实验多以动物为模型，尚无哮喘患者外周血IL．25水平报道。本实验以哮喘患者为研究对象，采用酶联免疫吸附试验检测哮喘患者外周血IL．25、IL-17与IL．4、IFN吖及lgE水平。并用血细胞分析仪进行嗜酸细胞计数，初步探讨IL—17、IL一25与哮喘发病关系。并联合IL-4、IFN-了及lgE和嗜酸细胞计数对其在哮喘发病的作用机制作以探讨。明确IL．17、IL．25在哮喘发病中的作用

3、，对探讨哮喘等变态反应性疾病的发病机制和探寻有效的治疗途径，具有重要的理论和实践意义。实验材料和方法一、实验材料1．研究对象2007年12月．2008年2月间，沈阳医学院奉天医院、沈阳市五院34例门诊支气管哮喘患者，(男2060，女14例；年龄21岁一5岁，平均47．5岁；)；采血前1个月内无治疗史；30例对照组为同期门诊健康体检者(男22例、女8例，平均年龄39岁)。2．主要试剂白细胞介素17(IL．17)酶联试剂盒白细胞介素25(IL．25)酶联试剂盒白细胞介素4(IL．4)酶联试剂盒干扰素丫(IFN一丫)酶联试剂盒免疫球蛋白(IgE)酶联试剂盒3．仪器设备TREUST

4、全自动酶免分析仪，超低温冰箱，MDF．U4086S型，台式超低温离心机，ST一21型，SF3000全自动血细胞分析仪二、实验方法德国eBio公司美国R￡D公司生物晶美公司西班斑波斯牙公司芬兰LABSYSTEMS公司美国SORvALL公司同本SYSMEX公司1．检测样本的收集采肘静脉血3m1，置于离心管中，静置30分钟，3000转／离心15分钟，分离血清，置．76。C超低温冰箱保存，另采肘静脉血2ml，置于含EDTAK2的采血管中，混均后，SF3000全自动血细胞分析仪检测嗜酸细胞计数。2．IL．17测定按说明书制定参数，稀释标准品，全自动酶免分析仪405nm和650nm波长

5、下测定吸光度改变，按照标准曲线计算浓度。3、IL一25测定(同上)4、．IL-4、IFN一丫、IgE测定严格按说明书制定参数，上机检测三．统计学处理各组检测结果利用SPSSl0．0统计软件分析，采用t检验，P

6、关键性细胞因子，Thl／Th2的失衡是哮喘发病的关键机制。Thl主要分泌IFN-丫，它能抑制IL．4功能，对抗Th2细胞功能，从而降l"氐IgE应答。Th2主要分泌IL．4，调节CD4+(Th)[甸Th2分化，它能促进B细胞分化，本次实验结果显示，哮喘患者外周血中IL．4、IgE水平升高，IFN．Y水平降低，IL一4与IgE呈正相关。提示Thl／Th2的平衡在哮喘患者的免疫调节中起着重要作用，IL．4、IFN．丫的水平与哮喘发病密切相关，IL．4在IgE的产生中起促进作用。一些病毒、支原体和衣原体感染可致产生IFN吖的CD4+和CD8+T淋巴细胞活化，通常使哮喘恶化。据此，

7、一些学者认为，Thl／Th2细胞相互制约并不能令人信服地解释哮喘发生的免疫失调机制。Thl7是近年来发现的一种不同于Thl和Th2细胞并产生IL．17的T11细胞亚群。人类IL．17(hIL．17)主要来源于记忆T细胞，外周血CD4+细胞受刺激后可产生高水平hlL．17。IL．17可以通过促进释放前炎性细胞因子来放大炎症反应。本实验中，哮喘患者外周血血浆中IL．17水平明显高于对照组，IL．17与IgE水平呈正相关，表明IL．17与哮喘发病关系密切。白细胞介素25(Interleukin25，IL．25)，又称作I