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《△np63基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、基金项目：重庆市卫生局计划项目(072032)作者单位：1.402160重庆医科大学附属永川医院泌尿外科2.400016重庆医科大学附属第一医院泌尿外科通信作者：吴小候，教授，博士生导师，E-mail：wuxiaohou80@hotmail.com电话：(023)89011122作者简介：张翾（1967-），男，主任医师，主要从事泌尿系统肿瘤研究△Np63基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制张翾1张家模1吴小候2何云锋2【摘要】:目的探讨癌基因△Np63对肿瘤膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响，并初步探讨其可能的分子机制。方
2、法通过将△Np63特异性短发夹RNA(shRNA)转染膀胱移行细胞癌（Transitionalcellcarcinomaofbladder,TCCB）5637细胞，用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和westernblot分别检测△Np63、p27kip1、p57kip2等mRNA和蛋白的表达水平，WST-1法检测细胞增殖活性，利用流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布，TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果特异性的△Np63-shRNA能够有效的沉默△Np63并上调p27kip1和p57kip2的基因和蛋白水平，转染△N
3、p63-shRNA的5637细胞的增殖能力明显受到抑制（P<0.05），且明显促进了细胞的凋亡(P<0.05)。结论靶向△Np63基因的shRNA片段可以有效的抑制人膀胱癌5637细胞的增殖并促进其凋亡，其可能的机制是通过上调p27kip1和p57kip2的表达实现的。【主题词】△Np63；膀胱癌；基因沉默；p27kip1；p57kip2【中图分类号】：R73-3Influenceof△Np63silenceonproliferationandapoptosisintransitionalcellcarcinomaoftheb
4、ladderanditsmolecularmechanismZHANGxuan1,ZHANGjiamo1,WUxiaohou2，HEyunfeng2,1.DepartmentofUrology,YongchuanAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversityChongqing,400016,China,2.DepartmentofUrology,FirstAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversityAbstract:ObjectiveTO
5、observetheinfluenceof△Np63geneontheproliferationandapoptosisoftransitionalcellcarcinomaofbladder(TCCB)tumor5637cells,andinvestigateitsmolecularmechanism.initiallyanalyzethemechanismofit.MethodsTransitionalcellcarcinomaofbladderTCCB5637cellsweretransfectedwith△Np63-s
6、hRNAorcontrol-shRNAexpressionvector.specificoligonucleotides.mRNAandproteinlevelsof△Np63,p27kip1andp57kip2weremeasuredbyrReversetranscriptase(RT)PCRandwesternboltwereusedtomeasure△Np63,p27kip1andp57kip2expressionatmRNAandproteinlevel,respectively.Thecellproliferatio
7、nwasassessedbyWST-1assay,andthechangesincellcyclewasevaluatedbyflowcytometry,cellapoptosiswasdetdctedbyTUNELmesthod.ResultsThespecificshRNAtargetedto△Np63genecoulddownregulatetheexpressionof△Np63andupregulatetheexpressionofp27kip1,p57kip2atmRNAandproteinlevel,thepro
8、liferationof5637cellswasmarkedlyinhibitedandtheapoptosisof5637cellswasincreasedtransfectedby△Np63-shRNA(P<0.05).ConclusionThe△Np63-shRNAco
