固定化脂肪酶与其在有机酶促反应中的性能.研究

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1、戳毫讫疆髓酪萋其簌毒撬蘸黎瑟鑫枣麴搀裁磅褒第一章文献综述1．董脂肪酶与两定托脂肪酶重．董+重瑟嚣酶酶结菊蠢辑宪遘燕酶舞曲盎耪璀铭裁，巽毒很高姆催弛劝鼗，疯糖转舅挂秘聂藏转暑蛙。近十年来，随着生物技术的发展，酶催化反应作为一种手段越来越多地被蠢规记擎寥霁l于骞瓠合戴，并应弼于嚣药、农药、薅薅弛擎品争’鹕筹毒瓣。羁前，霄2,000葶孛以上的酶已彼人们认识，其申200多截已嚣审售。用于有机合成中的酶大多数是脂肪酶和蛋由酶，尤以脂肪酶的应用更引人注薛鞭。；脂肪酸楚一类糖蛋白，其分子蛰在Jo,ooo～loo,ooo左右，耱基部分约占分子量的2％o-15％，主要成分怒甘露糖。

2、一般认为，脂肪酶魑两极，陡分子，吴青豪零撼端≤区)移菇拳端≤嚣》，英壤搦嚣瘸发妻在溥拳赛藩上，这是脂肪酶区别于其像酶的显藩特点。该界面对脂肪酶具有界面活化尊稻≤Interfacia!aclivetion)。臻J髂酶袁法零器西上酶激活率黎高，蠢密姨髅肪酶(PPL)被器面激涟水解活力比黠照高出18倍双上。避罄年，对脯肪酶靖构，特则是对脂肪酶三难结构的研究，使人们对脂肪酶作用的理耪敬孬?獯天妁进藏。嗡乳动物胰黯肟酶的结构是研绺得比较清楚的一类翡肪酶。图1-1给出了人胰滕肪酶(HpL)的一级结鞫糍。鸯銎】《虿憩，P尹氮鸯HPL一凝磐鹅专分秘枳，实际上HPL鼹一蹲簪霉棒枣褥

3、酶煮誊曩j麓≮；麓一：粼辩“菇j菇露簌固定亿a％骆祷爱其在裔视鸶穗葳应中的褴钝砩宪级结构与PPL和犬胰脂肪酶《CPL)分嬲有86％和68％妁一致缓。焉t—$～FP?。。嚣壶：&盎0；‰‰。。品昙。名mPP。Lsz～Lv’T：；T：；。，蕊．。。；：。，，。。。i。i熹。。，。一·鬣mc：——s—～：。：一，茹盘蕊。，。。。。嚣；zs-”t芸n*=一。：毒；：。。。。，。。。。。。。。，：。。，。’美mw；高”毒nx。毒。。。。鬈。‰：。；。：。誊：s：一点。x*。?：。A；：‰。?。，品。。。。，’”二isixos?∞n^oE≈∞：。5：晶∞?*；?c：g"m㈣”

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5、是Serl52，鸯His263乖Aspl76构成解脂部分Asp-His-Ser三元体(triad)，住于M米端区域内。擞不存在油水界面时，酶活性部分被一个蕊(Lid)或挡板(flap)掩盖，底物无法避入。这个盖是位于237和261残基二璃环翘的表磊嚣，撼威一令短程·螺旋覆盖活性部分，Trp252是该燕子的侧链，埋藏在活性部位的Serl52犬建睁萱_拳獬士筚≯啤霉。叠■_。：^。_j参。j量?j_鬣渣垂譬鲁‘西蹙的项部。谈酶与胰脂肪酶、肝脂肪酶具有相当程度的顺序同源性，属同族脂肪酶，可能有拥髑的三维结教，螺旋盖翅有两个保守的Cys约束，长度相似。但，胰脂肪酶同其它两

6、种脂肪酶《肝与脂蛋白脂肪酶)螺旋羞顺序每缺少霸嚣缝。辑以，姨鼹肪酶的螺旋盖岛凌蛋鸯糖I孥酶萤白孩缀成嵌合体结构时，没有酶活性P$1。由于螺旋盖在遇到油水界面时，进行结构重组，从前打开赢物同向活性部饿的通道，Trp252残基移至分予表面，同时，在活性住点入口处建造一屡藿要的虢水表赫，最终造成一个疏拳拨活性裂缝和氧阴离子空洞(Oxyanionhole)并调节水解机构。已研究的脂肪酶包括微生耱髓髂酶簿均骞可肆法拳器蘑辫识娉螺旋墓。霹1-2显零?寒黑毛霉脂肪酶界面活化的机构IloI．图1-2米黑毛霉艨肪酶的界面活化礴鳓睡警瞩獭囊鹣蠹瀵麓黧器鬻鎏裁糕囊i漾簿鞠蟹垮势。瓣譬=

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