脾胃湿热证湿热偏重量化的实验研究

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1、博士学位论文脾胃湿热证湿热偏重量化的实验研究博士研究生：廖荣鑫指导教师：吴仕九教授摘要目的与意义；脾胃湿热证其湿与热的偏重和量化是诊断与治疗的关键。本课题运用实验动物造模，通过施加多种因素：①湿热环境、②肥甘饮食(高糖高脂饲料)、⑧药物(白酒、附子干姜煎剂)、④致病微生物(大肠杆菌)的综合作用和中医经典、经验方(白虎加苍术汤、清香散)的治疗反证等手段来研究脾胃湿热证中湿偏重及热偏重的动物模型。并从动物的症状、体征、生化、免疫、病理等指标的变化量化湿热，以阐明脾胃湿热证形成的机理和病理基础，进一步揭示湿热证证的本质，为湿热证所属系列疾病的遣方用药奠定基础。方法：将清洁

2、级SD大鼠随机分成5组，即正常对照组，湿偏重组，热偏重组，清香散组，白虎加苍术汤组，每组8只。通过观察多种施加因素的作用和中医经典、经验方的治疗反证等手段来研究脾胃湿热证湿偏重及热偏重的动物模型。通过生化、免疫组化、电镜等手段检测尿液中AQP。变化及在肾脏的表达、血液中淋巴细胞HSP70表达，血液中胃动素、胃泌素变化，脾脏超微结构的改变及免疫组化指标(hi、Bcl-2、P53)等寻求湿偏重与热偏重的量化指标。研究内容和过程：1．造模方法及实验观察(1)造模方法正常对照组(简称A组)在20～28。C温度，50～70％相对湿度的环境下，以普通饲料喂养。湿偏重造模组(高糖

3、高脂+造模箱+白酒+大肠杆菌简称B组)高糖高脂饲料(在普通饲料中混入12％猪油，8％蜂蜜)喂养10天，然后置于造模箱(温度33_+2"C，相对湿度90～100％)，同时灌服北京产二锅头(2ml／2009，1次／日)，共8天，第19天开始灌胃，按2m1／2009给予大肠杆菌1次，24小时后再摘要加强感染1次(tml／2009)，移出鬣于自然环境，12小时后开始灌服蒸馏水，8ml／2009，2次／固，7天聪动物处死傲楗关检查。热偏重造模组(高糖商脂+造模箱+附予干姜煎剂+大肠杆菌简称C组)高糖舞l鼍键糕(匿上)喂券10天，然嚣墨予浚摸麓(瀑度33+2。C，攘对浸魔9e～

4、100％)，同时灌服附子干姜煎剂(2ml／2009，1次／EI)8天，第19天开始灌胃，按2m1／2009给予大场毒手蓠i次，24，j、辩衢再热强感染1次(Iml／2009)，移密置于自然环境，12小时后开始灌服蒸馏水，8ml／2009，1次／日，7天后动物处死馓相关浚查。清香教缀(赢糖高月鹭十造模箱+彝酒+大肠l千菌+漓香散简称D维)在漫偏重造模方法的基础上，移出置于自然环境12小时后开始灌服滴香散煎汁，8ml／2009，2次／曩，?天嚣秘秘处残锻相关检查。白虎加苍术汤组(高糖高脂+造模箱+附子干娄煎剂+大肠杆菌十白虎加苍术溺麓称E组)程熬镶豢造模方法懿墓销上，移

5、爨鹫予副豪环境12奎瓣居开始灌服白虎加苍术汤煎汁，8ml／2009，2次／日，7天后动物处死做相关检查。(2)实验蕊察各组邋过精神状态、游动情况、大使次数及性状、体温、饮食量等指标的测定可见：A组在喂养4周期间箕精神状态，活动魇应及大便帮无明显变化。而B、e鳃扶繁5天哭：始出现饮食量明是下降，大便澹泄或牯滞，舡激无明虽变化。进入造模箱并分别灌服白潸、附子于姜煎剂后，B组大便稀或溏泄，渐见肛周污秽，劳塞臻倦意，漕委}熬动，反瘦遮键，饮囊量继续减少，嚣瀑蠢轻度舞蔫。e组大便硬或干结表颇有粘液，好斗易激，饮食量减少，肛温明显升高。滋服大弱杆菌后，B、e组上述症状进一步翔重

6、。缳D缀蠢E缝在分黯藩鼹捂瘦药钫君，症状贫别有明显改蒋。从以上各组大鼠的体温、精神状态、饮食凝和大便性状等证候表现可以证实我们所建立的脾胃湿热证湿、热偏重大鼠模型的客观性。2。大鬣血浆中霹动素、胃泌索的变化胃动豢、胃泌索指标的变化能客观地反映体内消化功能的强弱。实验通过Ⅱ博士擎毽论文测定各组大鼠血浆中胃动索、胃泌素了解脾胃湿热证湿、热偏重时期消化功能的交化。结果显示：B组瓶浆胃动索增高，C组血浆胃动豢降低，分别与A组及D、E组比较有显著性差异0。05)。B、c组血浆胃泌索降低，而且B缀>c组，但两组比较无显著性差

7、舜(P>O．05)，分剐与A缀及D缓、E缝毙较有显著性差舞(P<0．05)。D、E缀蠡装黉泌豢与矗组无显著性差异(P>0．05)，提示D、E组能够有效调节皿浆胃泌索浓度，刺激雷羧分泌、促迸雷肠糕簇生长，使祝俸盘浆鹭澄豢浓度憝子正常隶平。3．大鼠尿液中AQ如的变化及在肾脏中的表达AOP。能调节机体永液代谢。因此AQ如对于瓣褥湿燕诞“湿”的形成、湿热的偏重量他，特别是湿的嫩亿具鸯熏要黪作用。实验通过测定各缀大鼠屎液中AQP。的变化及应用免疫组织化学方法检测AQP2在肾脏中的袭达。结果示：B组尿浚姻＆含鬃埂显减少，e缝大鼠模漤戆露波矗艘。会爨骥显壤趣，分爨与A缌、D维